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策马奔腾2013

新虫 (初入文坛)

[求助] 有没有做过双荧光实验的,求助 已有1人参与

是这样的,我构建了一个大鼠某个基因上游2000bp的克隆,载体是pGL3。阳性对照用的是CMV的启动子,最开始转染到大鼠PC12细胞里,阳性对照的Ration值在40左右,后来转染到HEK293细胞里,阳性对照的Ration之为1左右,阳性对照都是同一个质粒但是差别很大。我看了原始数据里的Read1和Read2。阳性对照Read1在PC12细胞里读数10万左右数量级,在HEK293里百万左右数量级。Read2在PC12细胞里读数5000-一万左右数量级,但是在HEK293细胞里读数在百万数量级。加的量都不变,构建的质粒加400ng,内参质粒加40ng。有没有遇到过类似情况的。
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xuzhu598

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
细胞类型不同,转染效率,表达什么的都会变化的。
2楼2014-10-28 00:06:09
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