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策马奔腾2013

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 9
帖子: 1
在线: 1.2小时
虫号: 2646224
注册: 2013-09-11
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能

[求助] 有没有做过双荧光实验的，求助已有1人参与

是这样的，我构建了一个大鼠某个基因上游2000bp的克隆，载体是pGL3。阳性对照用的是CMV的启动子，最开始转染到大鼠PC12细胞里，阳性对照的Ration值在40左右，后来转染到HEK293细胞里，阳性对照的Ration之为1左右，阳性对照都是同一个质粒但是差别很大。我看了原始数据里的Read1和Read2。阳性对照Read1在PC12细胞里读数10万左右数量级，在HEK293里百万左右数量级。Read2在PC12细胞里读数5000-一万左右数量级，但是在HEK293细胞里读数在百万数量级。加的量都不变，构建的质粒加400ng，内参质粒加40ng。有没有遇到过类似情况的。

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1楼 2014-10-27 18:13:15

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

xuzhu598

铁虫 (小有名气)

应助: 21 (小学生)
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性别: GG
专业: 肿瘤免疫

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

细胞类型不同，转染效率，表达什么的都会变化的。

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