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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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一苇杭之xmc

银虫 (初入文坛)

[求助] 双向电泳时间安排 已有2人参与

我将要进行双向电泳的实验,这个实验时间跨度很长,有的部分可能需要12h以上,这在时间安排上可能会有一点问题。想请教一下各位有经验的虫子,水化-第一向-第二向-染色脱色,这几个步骤你们大概都花费多久时间,两三天内完成一个周期的话时间大致需要如何安排(白天做哪一步,晚上做哪一步)?最好的有好心人奉献一下17cm及以上胶条的实验经验和建议~多谢多谢!
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欲速则不达
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一苇杭之xmc

银虫 (初入文坛)

大家帮帮忙啊
欲速则不达
2楼2014-10-22 12:39:19
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晓之梦魇

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

晚上7点多开始,配制水化上样缓冲液,胶条提前拿出至室温,还有水化盘平衡,基本上9点钟开始水化,过夜
然后第二天早上9点开始聚焦,聚焦时间一般需要10个小时以上,你可以最后一步设置500v  20h,过夜
聚焦开始后,洗板,等差不多干,喷上酒精,下午或者晚上提前装板
然后第三天早上9点开始配胶,然后基本上12点之前可以跑上第二向,第二向一般跑6~8小时,然后晚上染色,如果是考染就过夜,第四天早上起来脱色,成像即可;如果是银染,晚上固定,第四天早上开始银染过程。
3楼2014-11-13 12:03:25
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Rubisco580

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我是这样做的:
第一天上午水化,选择胶内进样,样品加在水化液里面,一起吸进去,这样水化和一向一起设置程序。
第一天下午洗板,晚上配胶,配好放置过夜,蒙上保鲜膜。
第二天上午一向结束,还原烷化,准备第二向的胶槽、缓冲液等,随后第二向。
二向结束后不急的话就固定过夜,着急的话当天晚上染色。
这样做有一个缺点,就是没法检测第一向的电流电压情况。所以只有确定没问题,能顺利升压到1万伏的样品我才这么做。
4楼2014-11-14 11:17:17
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