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mancai0112

铜虫 (初入文坛)

[求助] 双向电泳（GE）实验操作视频

急求助双向电泳（GE）实验操作视频
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1楼 2013-10-14 15:17:58
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DBWJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个视频应该很少的，自己参考手册做做看呗，实验中学习记得最牢了
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2楼2013-10-16 14:52:08
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第75粒米

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

在优酷网上，是有一个关于双向电泳的视频的，且讲的很详细，很好，你可以看一下，希望对你有帮助http://v.youku.com/v_show/id_XNDgwODgwNDk2.html
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3楼2013-10-22 09:58:33
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第75粒米

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-10-22 16:28:39
楼主，您好，你也在做双向电泳？能否问下，在跑第二向的时候跑完后，进行固定、致敏、银染、显色、终止，那其中的显色要多长时间呢？
我的固定30Min，致敏30min，银染了20min，那显色有具体时间么？还是直到显出点来为止呢？谢谢~
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4楼2013-10-22 10:01:51
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第75粒米

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by DBWJ at 2013-10-16 14:52:08
这个视频应该很少的，自己参考手册做做看呗，实验中学习记得最牢了

我现在手边儿的做电泳的参考手册里没有关于做完第二向电泳后的对胶进行处理的实验步骤，请问下，在跑第二向的时候跑完后，进行固定、致敏、银染、显色、终止，那其中的显色要多长时间呢？
我的固定30Min，致敏30min，银染了20min，那显色有具体时间么？还是直到显出点来为止呢？谢谢~
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5楼2013-10-22 10:03:50
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DBWJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-10-22 16:28:58
引用回帖:
5楼: Originally posted by 第75粒米 at 2013-10-22 10:03:50
我现在手边儿的做电泳的参考手册里没有关于做完第二向电泳后的对胶进行处理的实验步骤，请问下，在跑第二向的时候跑完后，进行固定、致敏、银染、显色、终止，那其中的显色要多长时间呢？
我的固定30Min，致敏30m ...

银染基本上看到点都出来了，背景刚刚出来就终止最好，这个得摸索了。
如果点特别的黑的话就是过了，要是正常银染的我这基本上也就3min--5min的样子就差不多了
这个还得根据上样量来定，我的上样量是80μg的，如果多的话显得就快，容易显过
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6楼2013-10-22 14:41:13
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第75粒米

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-10-22 16:29:03
引用回帖:
6楼: Originally posted by DBWJ at 2013-10-22 14:41:13
银染基本上看到点都出来了，背景刚刚出来就终止最好，这个得摸索了。
如果点特别的黑的话就是过了，要是正常银染的我这基本上也就3min--5min的样子就差不多了
这个还得根据上样量来定，我的上样量是80μg的，如果 ...

谢谢你啊，那我现在银染后的整个胶片全是黑的了，整进行显色，几乎感觉胶没啥变化啊，第一次做双向电泳，额~~貌似失败了，我现在进行的是显色，那怎么才算显色结束了呢，感谢解答
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7楼2013-10-22 14:49:10
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DBWJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

整个胶都黑了，就是显色过头了。要不就是敏化之后没有清洗好，显色结束就是你感觉胶上面的点都显出来了，背景不是特别的深的时候，这个时间就需要不断的尝试了。水的话能用多纯的就用多纯的，银染很灵敏的，如果水不干净背景就特别的脏
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8楼2013-10-22 16:43:16
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