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willschou

新虫 (初入文坛)

[求助] 双向电泳の溴酚蓝

最近电泳,转二向后,发现溴酚蓝跑的比蛋白还慢(蛋白没问题),过去从未有,换了溴酚蓝、电极液,还是一样,在此求助各位帮忙分析指导,谢谢了
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labbench

新虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

willschou: 回帖置顶 2012-12-06 20:10:13
你是菜鸟还是骨灰啊?含溴酚蓝的loading buffer配一次可以用1年。你每次新鲜加干嘛?
闲得发慌啊?
5楼2012-12-06 14:25:09
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chenqing860

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
willschou: 回帖置顶 2012-12-06 19:51:27
没碰到过这种问题,建议可以测一下电泳缓冲液的PH值是否正常,约8.3
6楼2012-12-06 16:43:36
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普通回帖

willschou

新虫 (初入文坛)

和过去相同的时间下,溴酚蓝跑了一半,蛋白跑完了。蛋白是原来的蛋白。
2楼2012-12-03 22:06:03
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labbench

新虫 (小有名气)


【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励应助 2012-12-06 20:16:36
肯定变动了什么。(时间不算)。一般问题是[+][-]电泳液咯?溴酚蓝单独的?还是loading buffer组分?
3楼2012-12-04 09:29:05
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willschou

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by labbench at 2012-12-04 09:29:05
肯定变动了什么。(时间不算)。一般问题是电泳液咯?溴酚蓝单独的?还是loading buffer组分?

单独的,我现在一个个排查,还是没头绪,sds倒是由粉末换成棒状的,其他都是进口,重新配还那样,难道是电压那坏了?
4楼2012-12-04 20:41:39
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willschou

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by chenqing860 at 2012-12-06 16:43:36
没碰到过这种问题,建议可以测一下电泳缓冲液的PH值是否正常,约8.3

确实变了,下极液6.5左右,上级液8.5,但是只用了一次就成这样了,每次都是换新的
7楼2012-12-06 19:52:25
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willschou

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by labbench at 2012-12-06 14:25:09
你是菜鸟还是骨灰啊?含溴酚蓝的loading buffer配一次可以用1年。你每次新鲜加干嘛?
闲得发慌啊?

我意思是溴酚蓝分装好的 一直是原来的
8楼2012-12-06 20:09:21
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labbench

新虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

SDS换回来。或者,把你怀疑的都换为kit。
9楼2012-12-13 10:58:43
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shsDerek

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

蛋白多大,电泳液成分没问题吗,loading没问题吗,
10楼2012-12-13 12:47:39
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