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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 双向电泳图求助
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410214185

新虫 (小有名气)

[求助] 双向电泳图求助

这张图是我跑的双向电泳图，想请前辈们看看，需要什么是应该优化的，是不是样品提的不好，所以图都在挤在一起了，还是跑胶的程序设计上有问题，谢谢啦。。。。急急急
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1楼2011-09-13 20:21:26
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guxinhan123

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
adslye(金币+1): 好问题！ 2011-09-14 16:04:57
说清楚是什么材料，蛋白质如何提取，聚焦程序，胶条范围等
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2楼2011-09-14 11:42:14
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410214185

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by guxinhan123 at 2011-09-14 11:42:14:
说清楚是什么材料，蛋白质如何提取，聚焦程序，胶条范围等

用的是拟南芥的根，蛋白提取用的是丙酮和TCA，大概说哈步骤，先在液氮中碾磨，加匀浆和TCA，静置，离心后，取上清，加丙酮，离心，取沉淀，加丙酮洗，因为没有冷冻干燥机，就直接加了裂解液，离心后，测蛋白浓度，后炮电泳。
聚焦程序是30v 16h，200v  30min，400v 30min，3000v  1h
（胶条是自己做的，7厘米的）
二向跑的时候一直保持20ma
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3楼2011-09-15 07:56:15
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hf2016

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

410214185(金币+5): 2011-09-20 17:46:22
酷似样品提的不好，而且一般不要用7cm胶条，分辨率太小，可以试试13cm的，自己做的胶条 没试过
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一切开始于结束之后
4楼2011-09-15 16:54:59
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410214185

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hf2016 at 2011-09-15 16:54:59:
酷似样品提的不好，而且一般不要用7cm胶条，分辨率太小，可以试试13cm的，自己做的胶条 没试过

哦，正准备重新提蛋白的，再跑一次看看的
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5楼2011-09-20 17:47:31
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