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410214185

新虫 (小有名气)

[求助] 双向电泳图求助

这张图是我跑的双向电泳图,想请前辈们看看,需要什么是应该优化的,是不是样品提的不好,所以图都在挤在一起了,还是跑胶的程序设计上有问题,谢谢啦。。。。急急急
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hf2016

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

410214185(金币+5): 2011-09-20 17:46:22
酷似样品提的不好,而且一般不要用7cm胶条,分辨率太小,可以试试13cm的,自己做的胶条 没试过
一切开始于结束之后
4楼2011-09-15 16:54:59
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查看全部 5 个回答

guxinhan123

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


adslye(金币+1): 好问题! 2011-09-14 16:04:57
说清楚是什么材料,蛋白质如何提取,聚焦程序,胶条范围等
2楼2011-09-14 11:42:14
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410214185

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by guxinhan123 at 2011-09-14 11:42:14:
说清楚是什么材料,蛋白质如何提取,聚焦程序,胶条范围等

用的是拟南芥的根,蛋白提取用的是丙酮和TCA,大概说哈步骤,先在液氮中碾磨,加匀浆和TCA,静置,离心后,取上清,加丙酮,离心,取沉淀,加丙酮洗,因为没有冷冻干燥机,就直接加了裂解液,离心后,测蛋白浓度,后炮电泳。
聚焦程序是30v 16h,200v  30min,400v 30min,3000v  1h
(胶条是自己做的,7厘米的)
二向跑的时候一直保持20ma
3楼2011-09-15 07:56:15
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410214185

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hf2016 at 2011-09-15 16:54:59:
酷似样品提的不好,而且一般不要用7cm胶条,分辨率太小,可以试试13cm的,自己做的胶条 没试过

哦,正准备重新提蛋白的,再跑一次看看的
5楼2011-09-20 17:47:31
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