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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 双向电泳图像问题分析
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独默林夕

铁虫 (初入文坛)

[交流] 双向电泳图像问题分析 已有4人参与

各位大神好：
          求助，关于双向电泳时为什么我的图像横纹特多？
  我跑的是17cm pH3-10的胶条，上样400ug,300ml  聚焦vh65000  电压8500v  限流50v/gel
双向电泳图像问题分析
0x900-1.jpg
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1楼 2013-06-21 11:34:29
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
感觉像是样品里盐浓度有些高，做除盐处理了吗？
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2楼2013-06-21 12:33:31
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wchuangqi

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-06-24 21:08:55
看着其实还行。一般PH3-10的胶条的两边都会出现这样的现象，只要中间区域的点比较sharp就OK。你可以试着增大总的电压，我觉得效果会更好。
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天道酬勤
3楼2013-06-22 02:56:16
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shark牛

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
感觉还好，看你的主要蛋白质分布，换个4~7的试试
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4楼2013-06-24 09:47:50
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独默林夕

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-06-21 12:33:31
感觉像是样品里盐浓度有些高，做除盐处理了吗？

我是TCA/丙酮加酚抽提的菌丝蛋白，按理说不会有很高浓度的盐啊，第一项等点聚焦时也有除盐程序
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5楼2013-06-24 15:54:45
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独默林夕

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wchuangqi at 2013-06-22 02:56:16
看着其实还行。一般PH3-10的胶条的两边都会出现这样的现象，只要中间区域的点比较sharp就OK。你可以试着增大总的电压，我觉得效果会更好。

感谢，可是我们双向电泳仪器最大电压就是8500v了，先换换pH4-7的试一试吧
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6楼2013-06-24 15:57:01
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 独默林夕 at 2013-06-24 15:54:45
我是TCA/丙酮加酚抽提的菌丝蛋白，按理说不会有很高浓度的盐啊，第一项等点聚焦时也有除盐程序...

试试稍微增加一点良性电解质。
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7楼2013-06-24 23:07:00
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可能有几个原因：
1.样品没有完全溶解，应该上样前确保样品完全溶解并且保持稳定；
2.样品中有干扰IEF的物质，应该改进样品的制备方法；
3.样品中有干扰离子，应该稀释样品或者透析以降低离子浓度，似的离子浓度低于10mmol/L，或者用丙酮、TCA沉淀样品；
4.样品中存在离子型去垢剂，如果制备样品的过程中使用了SDS，上样时的SDS浓度不应高于0.25%，应该用超滤或者透析方法处理样品后再上样。

仅供参考！
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8楼2013-06-25 00:07:22
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独默林夕

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-06-25 00:07:22
可能有几个原因：
1.样品没有完全溶解，应该上样前确保样品完全溶解并且保持稳定；
2.样品中有干扰IEF的物质，应该改进样品的制备方法；
3.样品中有干扰离子，应该稀释样品或者透析以降低离子浓度，似的离子浓度 ...

非常感谢，会采纳
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9楼2013-06-27 17:32:01
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