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双向电泳图像问题分析
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独默林夕
铁虫
(初入文坛)
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帖子: 9
在线: 3.2小时
虫号: 2455688
注册: 2013-05-09
专业: 植物病理学
[交流]
双向电泳图像问题分析
已有4人参与
各位大神好:
求助,关于双向电泳时为什么我的图像横纹特多?
我跑的是17cm pH3-10的胶条,上样400ug,300ml 聚焦vh65000 电压8500v 限流50v/gel
0x900-1.jpg
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1楼
2013-06-21 11:34:29
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凌波丽
专家顾问
(知名作家)
专家经验: +218
BioEPI: 11
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(硕士)
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注册: 2012-04-19
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MM
专业: 生物大分子结构与功能
管辖:
生物科学综合
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可能有几个原因:
1.样品没有完全溶解,应该上样前确保样品完全溶解并且保持稳定;
2.样品中有干扰IEF的物质,应该改进样品的制备方法;
3.样品中有干扰离子,应该稀释样品或者透析以降低离子浓度,似的离子浓度低于10mmol/L,或者用丙酮、TCA沉淀样品;
4.样品中存在离子型去垢剂,如果制备样品的过程中使用了SDS,上样时的SDS浓度不应高于0.25%,应该用超滤或者透析方法处理样品后再上样。
仅供参考!
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8楼
2013-06-25 00:07:22
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cicelyzh
铁杆木虫
(职业作家)
BioEPI: 4
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(讲师)
金币: 8693.8
红花: 72
帖子: 3516
在线: 456小时
虫号: 1614001
注册: 2012-02-13
专业: 生物化学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
感觉像是样品里盐浓度有些高,做除盐处理了吗?
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2楼
2013-06-21 12:33:31
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wchuangqi
铜虫
(小有名气)
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(小学生)
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红花: 1
帖子: 139
在线: 143.4小时
虫号: 827947
注册: 2009-08-14
性别: GG
专业: 植物生理与生化
★ ★
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137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~
2013-06-24 21:08:55
看着其实还行。一般PH3-10的胶条的两边都会出现这样的现象,只要中间区域的点比较sharp就OK。你可以试着增大总的电压,我觉得效果会更好。
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天道酬勤
3楼
2013-06-22 02:56:16
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shark牛
新虫
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应助: 0
(幼儿园)
金币: 231.8
帖子: 24
在线: 34.5小时
虫号: 1386703
注册: 2011-09-01
性别: GG
专业: 植物生理与生化
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
感觉还好,看你的主要蛋白质分布,换个4~7的试试
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4楼
2013-06-24 09:47:50
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