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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » ni柱重生问题
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yang2325182

金虫 (正式写手)

[交流] ni柱重生问题 已有2人参与

我的镍柱每次都是纯化同一种蛋白。。。。每次用完之后都需要重生么？
咪唑与蛋白竞争结合镍。。那么我最后用200mM咪唑洗，平衡之后，下次再用的时候会不会结合不上蛋白？
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o(╯□╰)o
1楼 2014-10-16 10:17:02
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yang2325182

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by haizhige2010 at 2014-10-16 14:05:00
我做镍柱层析的时候，每次目标蛋白洗脱之后，直接用0.1M氢氧化钠冲洗柱子，最后用20%乙醇封存。下次使用的时候用缓冲液平衡柱子。

哦哦。。。。多谢！
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o(╯□╰)o
3楼2014-10-16 18:09:26
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haizhige2010

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我做镍柱层析的时候，每次目标蛋白洗脱之后，直接用0.1M氢氧化钠冲洗柱子，最后用20%乙醇封存。下次使用的时候用缓冲液平衡柱子。
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污水处理专业人士
2楼2014-10-16 14:05:00
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
好像是要用盐酸洗把咪唑洗掉吧
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4楼2014-10-17 09:14:17
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yang2325182

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-10-17 09:14:17
好像是要用盐酸洗把咪唑洗掉吧

盐酸！！没听过啊。。。我师兄说水就可以洗掉！！
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o(╯□╰)o
5楼2014-10-17 10:46:14
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