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新虫 (正式写手)

[交流] 问咪唑洗脱完目标蛋白后,咪唑在柱上与镍结合,这个咪唑要不要除去 已有10人参与

如题,否则会不会影响下次的吸附纯化?
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灵岩苏

禁言 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

7楼2014-11-18 14:44:26
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普通回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
参考说明书,如果不洗掉柱上的咪唑,下次蛋白不直接洗下去了么?
行至水穷处,坐看云起时
2楼2014-10-04 18:19:13
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新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2014-10-04 18:19:13
参考说明书,如果不洗掉柱上的咪唑,下次蛋白不直接洗下去了么?

怎么洗掉
3楼2014-10-05 07:22:06
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璧月

捐助贵宾 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
正常不就是水洗,20%乙醇洗,保存吗?

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-10-05 07:48:12
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新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 璧月 at 2014-10-05 07:48:12
正常不就是水洗,20%乙醇洗,保存吗?

咪唑结合在镍柱上,可能是配位键、离子键、和疏水作用的共同作用,水洗能洗掉咪唑吗?同样在离子交换柱中最后一步一般有用1M的NaCl洗去全部蛋白,同问NaCl能用水洗掉吗?
5楼2014-10-05 11:06:47
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super_mm

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
当然要洗掉啊 用无咪唑的缓冲液或者水都可以洗掉,咪唑或His标签和镍柱是浓度依赖的竞争性结合的,所以用完柱子和下次上样前都要大量冲洗柱子的
6楼2014-10-11 10:52:24
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
咪唑肯定要洗掉,好像是用盐酸交换。
8楼2014-11-19 13:23:51
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xiaosheng123

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 灵岩苏 at 2014-11-18 14:44:26
这个可能和镍柱有关,你需要参考说明书的,建议需要洗掉的,我用七海的镍柱做实验,没差。

听说七海的镍柱载量挺高的,不知道是不是真的,载量大概有在多少?
9楼2014-11-26 15:54:56
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hajierlove

铜虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 灵岩苏 at 2014-11-18 14:44:26
这个可能和镍柱有关,你需要参考说明书的,建议需要洗掉的,我用七海的镍柱做实验,没差。

七海的镍柱效果怎么样?
踏实
10楼2014-12-01 17:07:33
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