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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » RT-PCR的引物设计
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sea4on

新虫 (小有名气)

[求助] RT-PCR的引物设计 已有1人参与

要用RT-PCR做人结肠癌细胞LOVO中CHOP基因的mRNA表达量测定。
请问各位大神，引物是如何设计的？
NCBI上人的chop基因貌似只有一个，按照那一个序列设计就行么？
求救！
谢谢各位~~
NCBI链接 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/1649
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1楼 2014-10-01 13:31:39
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焃__麟

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-11-12 11:23:11
根据该基因设计一对特异性引物就可以了
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行到水穷处，坐看云起时
2楼2014-10-01 17:07:33
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sea4on

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 焃__麟 at 2014-10-01 17:07:33
根据该基因设计一对特异性引物就可以了

是根据基因序列还是mRNA序列？
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3楼2014-10-07 21:23:24
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焃__麟

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by sea4on at 2014-10-07 14:23:24
是根据基因序列还是mRNA序列？...

用哪个做模板就用哪个设计引物呗
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行到水穷处，坐看云起时
4楼2014-10-07 22:12:19
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焃__麟

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
sea4on(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-10-08 08:40:51
定量的话，找到cds序列设计引物就OK了，不要用基因组DNA，因为有内含子
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行到水穷处，坐看云起时
5楼2014-10-07 22:15:38
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zy-2014

木虫 (小有名气)
以CDS序列设计特异性引物就OK了。
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6楼2014-11-12 08:43:56
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