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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 这样还能做实时定量PCR吗？
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nnndws

新虫 (初入文坛)

[求助] 这样还能做实时定量PCR吗？

如题！！

这样还能做实时定量PCR吗？
植物根总RNA电泳图片.png
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1楼 2014-09-30 14:54:25
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狼王啊

铁虫 (初入文坛)
RNA图吗？三条带呢 而且上样量太大了 稀释一下
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2楼2014-09-30 20:48:20
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nnndws

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 狼王啊 at 2014-09-30 20:48:20
RNA图吗？三条带呢 而且上样量太大了 稀释一下

谢谢你。跑的是RNA，2.5ul的RNA，3ul的loading buffer，marker点的是3ul。    电泳150V，25min。请问，跑的最快的最前面的亮带是降解吗？？
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3楼2014-10-01 09:41:21
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564539962

铁虫 (初入文坛)
貌似不可以呢，做荧光定量pcr最好是单一条带，如果有杂带，定量pcr就有可能出现双峰哦
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4楼2014-10-02 21:01:19
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张文波z

木虫 (正式写手)

新农人
这样做了可能也会效果不好吧？我之前做的看上去你你这量多，最后效果还不错，这量恐怕反转都不好

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道虽迩不行不至，事虽小不为不成。
5楼2014-10-02 23:29:35
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chaiyu2000

铜虫 (小有名气)
我提RNA后从没跑过电泳，直接PCR结果一直很好。建议：做个预实验小量试一把，看看结果如何
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6楼2014-10-03 09:42:53
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狼王啊

铁虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-03 22:18:11
引用回帖:
3楼: Originally posted by nnndws at 2014-10-01 09:41:21
谢谢你。跑的是RNA，2.5ul的RNA，3ul的loading buffer，marker点的是3ul。    电泳150V，25min。请问，跑的最快的最前面的亮带是降解吗？？...

亲 RNA浓度太大了 提的RNA可以最后20 DEPC水溶解，我一般再取1稀释60倍，取10上样检测，一般电压90，电压高了电极缓冲液温度就高，不太好
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7楼2014-10-03 16:05:17
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