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nnndws

新虫 (初入文坛)

[求助] 这样还能做实时定量PCR吗?

如题!!

这样还能做实时定量PCR吗?
植物根总RNA电泳图片.png
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狼王啊

铁虫 (初入文坛)

RNA图吗?三条带呢 而且上样量太大了 稀释一下
2楼2014-09-30 20:48:20
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nnndws

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 狼王啊 at 2014-09-30 20:48:20
RNA图吗?三条带呢 而且上样量太大了 稀释一下

谢谢你。跑的是RNA,2.5ul的RNA,3ul的loading buffer,marker点的是3ul。    电泳150V,25min。请问,跑的最快的最前面的亮带是降解吗??
3楼2014-10-01 09:41:21
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564539962

铁虫 (初入文坛)

貌似不可以呢,做荧光定量pcr最好是单一条带,如果有杂带,定量pcr就有可能出现双峰哦
4楼2014-10-02 21:01:19
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张文波z

木虫 (正式写手)

新农人

这样做了可能也会效果不好吧?我之前做的看上去你你这量多,最后效果还不错,这量恐怕反转都不好

[ 发自小木虫客户端 ]
道虽迩不行不至,事虽小不为不成。
5楼2014-10-02 23:29:35
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chaiyu2000

铜虫 (小有名气)

我提RNA后从没跑过电泳,直接PCR结果一直很好。建议:做个预实验小量试一把,看看结果如何
6楼2014-10-03 09:42:53
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狼王啊

铁虫 (初入文坛)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-03 22:18:11
引用回帖:
3楼: Originally posted by nnndws at 2014-10-01 09:41:21
谢谢你。跑的是RNA,2.5ul的RNA,3ul的loading buffer,marker点的是3ul。    电泳150V,25min。请问,跑的最快的最前面的亮带是降解吗??...

亲 RNA浓度太大了 提的RNA可以最后20 DEPC水溶解,我一般再取1稀释60倍,取10上样检测,一般电压90,电压高了电极缓冲液温度就高,不太好
7楼2014-10-03 16:05:17
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