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请各位虫友帮忙定一下最佳退火温度 已有2人参与
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各位虫友，如图是我设计引物后的pcr电泳图，不知道选哪个温度作为退火温度为最好，请各位虫友帮忙选择一下最佳的退火温度！谢谢！～ 还想问一下：在62.4和63.8的条带下有隐约可见的条带，这是什么东东？_？ 另外说明两点：1.hotstart taq 酶对消除引物二聚体非常管用，我用普通酶做的引物二聚体非常明显，如图用HS Taq后效果很好； 2.网上传说的抑制引物二聚体产生的方法：将上下游引物混合后，在100摄氏度沸水中煮5min，迅速置于冰上瞬时冷却，再加入体系中。我用这个方法试了，结果电泳图上什么都没有。不知道是否是因为沸水中煮将引物一级结构破坏导致无法反应，如果是的话看来经验性的东西不能迷信盲从啊！  Sg2 Primer-designing Test(hotstart taq).jpg |
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