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黄小木90

金虫 (小有名气)

[求助] 考马斯亮蓝测蛋白标准曲线 已有8人参与

最近在做考马斯亮蓝标准曲线,做了好几次,但是标准曲线都不过0点,而且吸光值基本都大于1(集中在0.8-1.3),方法是按照最常用的方法,不知道是哪里有了问题,求大神给解答
标准蛋白浓度是0-100μg/ml
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南纬27度

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
黄小木90: 金币+3 2014-09-20 20:39:51
容器或者试剂有问题。
好久不见...
8楼2014-09-20 13:32:21
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
黄小木90: 金币+5 2014-09-19 21:25:32
标准曲线不过零点很正常的
2楼2014-09-19 20:18:05
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黄小木90

金虫 (小有名气)

问题是差的太大,用蒸馏水做空白,应该是比较接近(0,0)点,但是截距都是在0.5左右,差太大了
3楼2014-09-19 21:25:19
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lov_new

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
黄小木90: 金币+5 2014-09-20 20:37:41
这种情况很有可能是比色管、比色皿等工具粘附有蛋白没洗干净或者染色剂贴在比色皿上。
如果空白有0.5的吸光度,肉眼很容易就看出来了。
注意要用酒精清洗干净各种工具。
4楼2014-09-20 09:22:25
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