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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 哪位大神能帮我分析一下我的测序峰图
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杨柳依依625

铁虫 (小有名气)

[求助] 哪位大神能帮我分析一下我的测序峰图 已有4人参与

前面的还挺好
到后面就凌乱了
能帮我分析一下原因吗
这种测序靠谱吗？
谢谢

哪位大神能帮我分析一下我的测序峰图
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哪位大神能帮我分析一下我的测序峰图-1
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1楼 2014-09-12 21:22:01
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liukun261

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-09-13 23:32:19
杨柳依依625: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-19 09:06:11
本帖内容被屏蔽
2楼2014-09-12 21:35:32
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杨柳依依625

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liukun261 at 2014-09-12 21:35:32
楼主好
    看了你的测序峰图，前面那张比较正常，每个碱基都可以看的很清楚，区分度也很好，但是后面的那个就相当差了，测序结果基本不可信吧。

    我不知道你是哪个公司的测序结果，我们实验室一般是送上海生 ...

前面的图不是单一的峰吗？我是在南京金斯瑞测序的，而且我当时选择的是正向测序，我是要做鉴定的，他们说有效长度只能到800bp，所以后面的不准确，但是前面的应该是可以的对吗？这个结果是不是不好采纳？
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3楼2014-09-13 09:27:17
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bwangel

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第一张能用，第二张不能用，不过你第二张是截取的吧，第二张显示的区域不准点而已
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4楼2014-09-13 10:38:21
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erlei

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第二张图出现套峰，峰图太乱了，结果不可靠，可以换一家测序公司在测一次
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5楼2014-09-13 12:19:24
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wangsanhu

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-09-13 23:32:49
杨柳依依625: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-19 09:05:48
测序图就是这样的，看你的第二张照片显示的1000bp以后的序列，一般认为最长800左右的序列可信，看你测定目的基因片段长度多长，假如少于800bp就测一次就好了，大于800bp就可以测两次，公司给你的可能是测通的序列，就是两次测序结果拼接好的序列，假如没给你测通序列，自己取可信区间序列自己用软件拼接好接可以了！

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DOYOUBEST!
6楼2014-09-13 12:57:21
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杨柳依依625

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by bwangel at 2014-09-13 10:38:21
第一张能用，第二张不能用，不过你第二张是截取的吧，第二张显示的区域不准点而已

两张都是截取的，一共一千多个bp
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7楼2014-09-13 13:07:22
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杨柳依依625

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wangsanhu at 2014-09-13 12:57:21
测序图就是这样的，看你的第二张照片显示的1000bp以后的序列，一般认为最长800左右的序列可信，看你测定目的基因片段长度多长，假如少于800bp就测一次就好了，大于800bp就可以测两次，公司给你的可能是测通的序列， ...

我是要鉴定用的，它测出来的一共1千多bp，我选择的是正向测序，没有选测通
那这样是不是800以后的就不能截取了？
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8楼2014-09-13 13:08:42
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wangsanhu

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 杨柳依依625 at 2014-09-13 13:08:42
我是要鉴定用的，它测出来的一共1千多bp，我选择的是正向测序，没有选测通
那这样是不是800以后的就不能截取了？...

你的目的片段多长？

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DOYOUBEST!
9楼2014-09-13 13:26:29
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wangsanhu

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 杨柳依依625 at 2014-09-13 13:08:42
我是要鉴定用的，它测出来的一共1千多bp，我选择的是正向测序，没有选测通
那这样是不是800以后的就不能截取了？...

你还是没有理解我跟你说的，假如你片段超过800bp，肯定要测两次，那样才能拼接序列，假如小于800bp，假设你的片段只有500bp，你的结果肯定包括载体的一段序列，你要自己会拼接和排除这些序列！

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10楼2014-09-13 13:36:54
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