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wmhhc

新虫 (初入文坛)

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[求助] 镍柱纯化，咪唑使蛋白失活怎么办已有1人参与

在纯化一个蛋白，辅酶因子会和咪唑结合，然后蛋白是就去活性了，试过加入金属离子把咪唑从辅酶因子上结合出来，但貌似不起效果。有有过类似经验的虫友吗？要怎么解决纯化呢？
多谢啦！

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1楼 2014-09-11 05:29:34

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1020490511

银虫 (小有名气)

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能说一下你用的缓冲液吗？

[ 发自小木虫客户端 ]

2楼2014-09-11 16:03:41

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zero19871029

新虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

导致蛋白失活的是洗脱下来的镍离子，咪唑基本不会对蛋白活性造成影响，可以选用质量好一点的镍柱，洗脱下来之后做个透析脱盐，超滤浓缩一下，如果实在是不起作用，就换个标签吧

3楼2014-09-11 17:31:59

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