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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » MTT问题求助啊~
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rickyjay2014

金虫 (正式写手)

[求助] MTT问题求助啊~ 已有2人参与

之前一直做MTT实验，然后新买了MTT粉末配置之后，避光什么的问题都注意的很好了。然后细胞培养后加入作用液后，整个孔板都变成了蓝紫色，请问哪位亲帮助一下，是哪里除了问题，应该是加入作用液后孔板是黄绿色。求助啊！
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天天看文献，好好做实验
1楼 2014-09-10 10:15:03
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失望，希望

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zjf710 at 2014-09-11 05:55:33
应该是细胞破碎了或凋亡了，大量琥珀酸脱氢酶泄露至培养基，导致这种情况。
建议：去除培养上清，用终浓度0.5mg/ml的MTT PBS液，加入200或100微升，继续温浴4h。

请问怎么确定细胞破碎了，琥珀酸脱氢酶泄露。我最近做MTT实验，设置的药物浓度范围很大，但是加了MTT之后，OD值没有梯度变化，都很大
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没有到不了的明天
4楼2018-02-01 16:16:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
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yqbter

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是立刻变成蓝紫色吗？如果是，培养基细胞污染了。
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2楼2014-09-10 14:06:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zjf710

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
rickyjay2014: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢。 2014-09-23 09:46:36
应该是细胞破碎了或凋亡了，大量琥珀酸脱氢酶泄露至培养基，导致这种情况。
建议：去除培养上清，用终浓度0.5mg/ml的MTT PBS液，加入200或100微升，继续温浴4h。
赞一下(2人) 回复此楼
三人行，必有我师焉
3楼2014-09-11 05:55:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

失望，希望

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zjf710 at 2014-09-11 05:55:33
应该是细胞破碎了或凋亡了，大量琥珀酸脱氢酶泄露至培养基，导致这种情况。
建议：去除培养上清，用终浓度0.5mg/ml的MTT PBS液，加入200或100微升，继续温浴4h。

希望楼主能够提供帮助
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没有到不了的明天
5楼2018-02-01 16:19:19
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