| 查看: 2410 | 回复: 7 | ||||
[交流]
什么是 MTT assay 已有4人参与
|
| 什么是MTT assay，请知道的给一个详细的答案！谢谢! |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 实验技术 |
» 猜你喜欢
复试调剂
已经有7人回复
-
一志愿北京化工085600 310分求调剂
已经有13人回复
-
085600，专业课化工原理，320分求调剂
已经有10人回复
-
288求调剂
已经有5人回复
-
0703化学321分求调剂
已经有16人回复
-
318求调剂
已经有13人回复
-
一志愿南航，数一英一学硕317求调剂！！
已经有5人回复
-
一志愿9材料学硕297已过六级求调剂推荐
已经有11人回复
-
085602调剂 初试总分335
已经有5人回复
-
302分 085601求调剂推荐
已经有8人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- MTT问题请教
已经有3人回复
- MTT法请教
已经有35人回复
- MTT法测活细菌数的具体操作步骤
已经有5人回复
- 【求助/交流】请问MTT和MTS有什么区别！
已经有9人回复
- 【求助/交流】MTT实验中加MTT不显紫色
已经有24人回复
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
jdklgjldg(金币+1,VIP+0): 7-23 22:21
小木虫: 金币+2, 帖子真精彩 2015-09-24 22:08:03
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
jdklgjldg(金币+1,VIP+0): 7-23 22:21
小木虫: 金币+2, 帖子真精彩 2015-09-24 22:08:03
|
MTT原理 MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide，是一种黄颜色的染料。活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶能够代谢还原MTT，同时在细胞色素C的作用下，生成蓝色（或蓝紫色）不溶于水的甲臜（Formazan），甲臜的多少可以用酶标仪在570nm 处进行测定。在通常情况下，甲臜生成量与活细胞数成正比，因此可根据光密度OD值推测出活细胞的数目。由于死细胞中不含琥珀酸脱氢酶，因此加入MTT 不会有反应。 MTT 溶液的配制方法 通常，此法中的MTT 浓度为5mg/ml。因此，可以称取MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸缓冲液（PBS）或无酚红的培养基中，用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌，放4℃ 避光保存即可。在配制和保存的过程中，容器最好用铝箔纸包住。 需要注意的是，MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力，但不能测定细胞绝对数。在用酶标仪检测结果的时候，为了保证实验结果的线性，MTT 吸光度最好在0-0.7 范围内。 实验方法 This procedure is for cells in 96 well plates, if larger plates are used then adjust volumes accordingly. 1. Make a solution of 5mg/ml MTT dissolved in PBS and filter sterilise through a 0.2µM filter and stored at 2-8℃（can be stored for 3 months). 2. 5 hours before the end of the incubation, add 20 µl of MTT solution from step one to each well containing cells. 3. Incubate the plate at 37℃ for 4-5 hours. 4. Remove media with needle and syringe. 5. Add 150 µl(or 200 µl) of DMSO to each well and pipette up and down to dissolve crytals. 6. Put plate into the incubator for 5min to dissovle air bubbles. Transfer to plate reader and measure absorbance at wavelength between 500 and 600 nm(usually 570nm or 550nm). |
2楼2009-07-23 16:31:12
zdfang83
木虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 3436.5
- 散金: 120
- 红花: 4
- 帖子: 991
- 在线: 213.6小时
- 虫号: 450945
- 注册: 2007-11-04
- 性别: GG
- 专业: 食品科学基础
3楼2009-07-23 21:51:38
4楼2009-07-24 00:25:16
koozb-1982
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1796
- 散金: 5
- 帖子: 237
- 在线: 17.5小时
- 虫号: 610547
- 注册: 2008-09-23
- 性别: GG
- 专业: 合成药物化学
5楼2010-05-26 16:25:27
6楼2011-03-11 18:04:18
桃李之乐
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 8115.5
- 散金: 1100
- 红花: 4
- 帖子: 1338
- 在线: 540.4小时
- 虫号: 1593832
- 注册: 2012-02-01
- 专业: 抗感染药物药理
7楼2012-02-08 15:03:50
 |
8楼2015-05-14 08:34:50
