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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 什么是 MTT assay
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cmcmy

银虫 (小有名气)

[交流] 什么是 MTT assay 已有4人参与

什么是MTT assay，请知道的给一个详细的答案！谢谢!
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1楼 2009-07-23 16:23:17
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fruit

木虫 (小有名气)
★ ★
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jdklgjldg(金币+1,VIP+0): 7-23 22:21
小木虫: 金币+2, 帖子真精彩 2015-09-24 22:08:03
MTT原理
MTT全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide，是一种黄颜色的染料。活细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶能够代谢还原MTT，同时在细胞色素C的作用下，生成蓝色（或蓝紫色）不溶于水的甲臜（Formazan），甲臜的多少可以用酶标仪在570nm 处进行测定。在通常情况下，甲臜生成量与活细胞数成正比，因此可根据光密度OD值推测出活细胞的数目。由于死细胞中不含琥珀酸脱氢酶，因此加入MTT 不会有反应。

MTT 溶液的配制方法
通常，此法中的MTT 浓度为5mg/ml。因此，可以称取MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸缓冲液（PBS）或无酚红的培养基中，用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌，放4℃ 避光保存即可。在配制和保存的过程中，容器最好用铝箔纸包住。
需要注意的是，MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力，但不能测定细胞绝对数。在用酶标仪检测结果的时候，为了保证实验结果的线性，MTT 吸光度最好在0-0.7 范围内。

实验方法
This procedure is for cells in 96 well plates, if larger plates are used then adjust volumes accordingly.

1. Make a solution of 5mg/ml MTT dissolved in PBS and filter sterilise through a 0.2µM filter and stored at 2-8℃（can be stored for 3 months).

2. 5 hours before the end of the incubation, add 20 µl of MTT solution from step one to each well containing cells.

3. Incubate the plate at 37℃ for 4-5 hours.

4. Remove media with needle and syringe.

5. Add 150 µl(or 200 µl) of DMSO to each well and pipette up and down to dissolve crytals.

6. Put plate into the incubator for 5min to dissovle air bubbles.

Transfer to plate reader and measure absorbance at wavelength between 500 and 600 nm(usually 570nm or 550nm).
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2楼2009-07-23 16:31:12
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zdfang83

木虫 (正式写手)

我们实验室用的一个MTT实验方法

★
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这是我们实验室用的一个小鼠脾淋巴细胞转化实验的方法
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3楼2009-07-23 21:51:38
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蓝皮鼠7983

至尊木虫 (文坛精英)

飞过蓝天
★
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楼上介绍的很详细,学习了
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海到尽头天做岸，山登绝顶我为峰。
4楼2009-07-24 00:25:16
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koozb-1982

木虫 (小有名气)
★
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也学习一下！！
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5楼2010-05-26 16:25:27
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guanjiyu

新虫 (初入文坛)

谢谢

谢谢楼上
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6楼2011-03-11 18:04:18
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桃李之乐

铁杆木虫 (著名写手)
谢谢楼上的几位
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反观自省
7楼2012-02-08 15:03:50
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DORIS偲偲
8楼2015-05-14 08:34:50
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