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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » MTT法测活细菌数的具体操作步骤
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su1111

新虫 (初入文坛)

[求助] MTT法测活细菌数的具体操作步骤

如题，想请教下各位老师，MTT法测活细菌数的具体才操作步骤？
    谢谢！
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1楼 2011-06-19 21:33:29
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hanguorui110

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wolfebst(金币+3, EPI+1): 鼓励 2011-06-20 11:01:10
su1111(金币+1): 2011-06-22 09:41:29
su1111(金币+1): 2011-06-22 10:36:14
（1）单细胞悬液接种于96孔培养板；103-104细胞/孔，每孔培养基总量200微升（96孔培养板每孔容积370微升），37℃、5％
CO2培养箱中培养一段时间（根据实验目的决定培养时间）
（2）加入2毫克／毫升的MTT液（50微升／孔）；继续培养3小时。
（3）吸出孔内培养液后，加入DMSO液（150微升／孔），将培养板置于微孔板扳荡器上振荡10分钟，使结晶物溶解。
（4）酶标仪检测各孔OD值（检测波长570纳米）。记录结果，绘制
希望对你有帮助
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鱼对水说你看不到我的眼泪，因为我在水里．水说我能感觉到你的眼泪，因为你在我心里。
2楼2011-06-20 10:40:28
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su1111

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by hanguorui110 at 2011-06-20 10:40:28:
（1）单细胞悬液接种于96孔培养板；103-104细胞/孔，每孔培养基总量200微升（96孔培养板每孔容积370微升），37℃、5％
CO2培养箱中培养一段时间（根据实验目的决定培养时间）
（2）加入2毫克／毫升的MTT液（50微 ...

谢谢， 请问这是做细菌MTT的操作步骤吗?
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3楼2011-06-22 10:38:28
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hanguorui110

木虫 (小有名气)
我是在图书馆找的呵呵  我也是不大确定
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鱼对水说你看不到我的眼泪，因为我在水里．水说我能感觉到你的眼泪，因为你在我心里。
4楼2011-06-22 11:21:51
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
刚刚有人发表MTT测定大肠杆菌 的操作步骤^_^

链接：http://www.sciencedirect.com/sci ... i/S0167701210002307

Journal of Microbiological Methods
Volume 82, Issue 3, September 2010, Pages 330-333
doi:10.1016/j.mimet.2010.06.014 | How to Cite or Link Using DOI
  P

Sample Text


Hengwei Wanga, b, Hairong Chengb, Fengqing Wanga, Dongzhi Weia and
Abstract
To reduce the interference in MTT reduction assay, we developed an improved protocol for evaluating the viability of Escherichia coli cells by conducting MTT reduction in 1.5-mL centrifuge tubes and formazan dissolution in test tubes. Our study is helpful in developing protocols for measuring the viability of other gram-negative bacteria.

Keywords: MTT reduction; Formazan; E. coli; Viability
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
5楼2011-06-24 19:48:44
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
引用回帖:
Originally posted by HarveyWang at 2011-06-24 19:48:44:
刚刚有人发表MTT测定大肠杆菌 的操作步骤^_^

链接：http://www.sciencedirect.com/sci ... i/S0167701210002307

Journal of Microbiological Methods
Volume 82, Issue 3, September ...

忘了，上面的文章的topic附上^_^ ：

An improved 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) reduction assay for evaluating the viability of Escherichia coli cells

Journal of Microbiological Methods
Volume 82, Issue 3, September 2010, Pages 330-333
doi:10.1016/j.mimet.2010.06.014 | How to Cite or Link Using DOI
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
6楼2011-06-24 19:50:41
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