应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » MTT法请教
361/4返回列表1234下一页
查看: 2696  |  回复: 35
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Melodyzhang

金虫 (正式写手)

[求助] MTT法请教

我做的MTT空白孔为什么比有细胞的孔OD值要高很多啊？做空白对照的96孔板是新打开的，加了100微升1640和20微升MTT，37度4小时之后再加150微升DMSO，有细胞的孔处理方法一样，可是测出来的值反而空白孔OD高，到底是哪里除了问题啊？我是做MTT法的新手，哪位大侠能不能帮帮我啊？谢谢
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

科研资源

» 猜你喜欢
waiting
1楼 2011-08-12 02:25:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

nicknelson

至尊木虫 (职业作家)
★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-08-15 10:26:47
MTS是MTT的升级版，promega公司的产品。你上公司网页上找就行。我用MTS也出现过调零孔比细胞孔数值还要高的情况，不知道为什么，不过很少见。有人在加MTS时，先把培养基和MTS混合好，再把每个孔换液加进去，好像能避免这种情况，不过这种情况很少见。
赞一下(2人) 回复此楼
13楼2011-08-15 00:16:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

马龙sweeting

木虫 (正式写手)
★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-08-16 19:22:17
我是这么做的：每孔加20微升MTT，4小时后，把MTT连培养液一起吸出，要吸干净，然后加150微升DMSO，摇床10min，酶标仪检测。  
调零孔比试验孔高可能是因为你的培养液里染了细胞，可能是因为操作不规范等等把细胞带入培养液了，你可以取少量培养液在显微镜下观察一下看看有没有细胞~~
赞一下(2人) 回复此楼
16楼2011-08-16 16:38:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Melodyzhang

金虫 (正式写手)
引用回帖:
33楼: Originally posted by 倪言 at 2013-08-30 14:01:01
我一般把MTT之间加到1640培养基里面的 培养基为100μl，MTT加4μl ，培养4小时后，把培养基（含MTT）用吸掉 ，然后加DMSO（200μl） 之后震荡， 然后595nm测od，行不？...

我觉得还不是吸掉MTT好，因为吸的的时候残留物的多少你也不好掌控，培养完之后直接加DMSO测，这样比较好
赞一下(1人) 回复此楼
waiting
34楼2013-08-30 14:12:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

浪人利利

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 感谢应助，祝顺利！ 2011-08-12 09:48:12
Melodyzhang(金币+1): 2011-08-12 18:51:26
培养液和MTT不要倒掉，直接加DMSO后轻摇，再测一下试试
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-08-12 08:45:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Melodyzhang

金虫 (正式写手)
谢谢哦~~~~可是我就是都没有倒掉培养液测的啊~~~，我还害怕含血清的1640会影响OD，所以吸掉旧培养液用PBS漂洗一遍之后，吸净PBS，换为不含血清的1640培养4h，可是测出的结果就是前五天有细胞的孔OD值比空白都要低~~~这到底是什么地方出问题了啊？
赞一下 回复此楼
waiting
3楼2011-08-12 15:21:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangyu4198

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-08-12 19:07:13
我们实验室是这样做的 ：我们把MTT之间加到1640培养基里面的 培养基一般100μl，MTT加10μl ，37度培养四小时后，把培养基（含MTT）用1ml注射器 吸掉 ，然后加DMSO（150μl） 之后震荡10min 后 直接测了
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-08-12 18:24:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Melodyzhang

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wangyu4198 at 2011-08-12 18:24:23:
我们实验室是这样做的 ：我们把MTT之间加到1640培养基里面的 培养基一般100μl，MTT加10μl ，37度培养四小时后，把培养基（含MTT）用1ml注射器 吸掉 ，然后加DMSO（150μl） 之后震荡10min 后 直接测了

谢谢~~~~~我看到论坛里有的虫虫是吸出培养基有的是不吸出，觉得应该都可以吧，不吸出来就是怕吸跑结晶。可是为什么是同样的1640和MTT，空白孔却比有细胞的孔OD值大呢？谢谢大家
赞一下 回复此楼
waiting
5楼2011-08-12 19:09:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爽爽04

铜虫 (初入文坛)
建议还是将培养基完全吸干再加DMSO摇匀再测哦
赞一下 回复此楼
6楼2011-08-13 12:15:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nicknelson

至尊木虫 (职业作家)
换MTS吧，MTT过时了。
赞一下 回复此楼
7楼2011-08-14 21:12:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Melodyzhang

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by nicknelson at 2011-08-14 21:12:41:
换MTS吧，MTT过时了。

哦~~~~好像也是哦~~~~
你也遇到过这样的问题吗？
赞一下 回复此楼
waiting
8楼2011-08-14 21:42:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nicknelson

至尊木虫 (职业作家)
★ ★
adslye(金币+2): 感谢交流~祝顺利！ 2011-08-19 11:27:00
因为MTT操作太麻烦，容易导致误差很大，甚至出现严重错误。你加DMSO时没有把1640吸出来吗？一个空能装270微升那么多吗？
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2011-08-14 21:53:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Melodyzhang

金虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by nicknelson at 2011-08-14 21:53:02:
因为MTT操作太麻烦，容易导致误差很大，甚至出现严重错误。你加DMSO时没有把1640吸出来吗？一个空能装270微升那么多吗？

嗯，没有吸出来，因为晶体太容易被吸走了，一个孔可以装下270微升的~~~~
赞一下 回复此楼
waiting
10楼2011-08-14 22:07:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Melodyzhang 的主题更新
361/4返回列表1234下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 294求调剂 +7 淡然654321 2026-04-15 7/350 2026-04-15 19:59 by PengTangGeoE
[考研] 药学求调剂 +11 RussHu 2026-04-12 13/650 2026-04-15 19:07 by zhuwenxu
[考研] 求调剂学校 +13 不会吃肉 2026-04-13 15/750 2026-04-15 12:49 by 西北望—风沙
[考研] 本科211，报考085601-310分 +16 ararak 2026-04-13 16/800 2026-04-14 14:55 by Delta2012
[考研] 考研求调剂 +6 ban班小七 2026-04-11 6/300 2026-04-14 14:06 by 哆啦A梦只是个梦
[考研] 食品与营养（0955）271求调剂 +15 升格阿达 2026-04-12 16/800 2026-04-14 13:18 by 浮若_安生
[考研] 一志愿哈工大 085600 277 12材科基求调剂 5+5 chenny174 2026-04-10 37/1850 2026-04-14 07:39 by Abskk
[考研] 一志愿华南理工大学331分材料求调剂 +10 天下ww 2026-04-09 11/550 2026-04-13 23:25 by pies112
[考研] B区0809 ，数一英一，290 求调剂 +3 泠潍1111 2026-04-12 4/200 2026-04-13 20:35 by 学员JpLReM
[考研] 材料考研调剂 +29 云木达达 2026-04-11 31/1550 2026-04-13 13:32 by lyh鲁老师
[考研] 314求调剂 +24 wakeluofu 2026-04-09 25/1250 2026-04-13 08:58 by lhj2009
[考研] 0854调剂 +12 长弓傲 2026-04-09 13/650 2026-04-12 09:56 by 逆水乘风
[考研] 280求调剂 +13 wzzz王 2026-04-09 13/650 2026-04-12 00:31 by 勇攀高峰0126
[考研] 22408调剂315分 +3 zhuangyan123 2026-04-09 3/150 2026-04-12 00:25 by 蓝云思雨
[考研] 085410 273分调剂 +4 X1999 2026-04-09 4/200 2026-04-11 13:05 by pies112
[考研] 求调剂 +6 archer.. 2026-04-09 8/400 2026-04-11 10:55 by zhq0425
[考研] 0854调剂 +5 音像店听花鼓戏 2026-04-10 5/250 2026-04-11 10:49 by qingpingzhu
[考研] 297求调剂 +9 Kwgyz 2026-04-09 9/450 2026-04-11 10:09 by zhq0425
[考研] 吉大计算机技术331分，英语六级，求调剂 +3 峰峰021116 2026-04-09 3/150 2026-04-10 20:01 by chemisry
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +9 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-09 10/500 2026-04-09 20:01 by Orcid
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭