应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » MTT法请教
362/4返回列表上一页1234下一页
查看: 3057  |  回复: 35
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

nicknelson

至尊木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★
看天(金币+4): 鼓励交流 2011-08-18 23:49:17
那我觉得可能有几种原因：1是你加入DMSO后没有震荡，或者由于有培养基所以DMSO浓度小，导致MTT反应产物没有完全溶解，所以测得的数据不准确。2是如果你加入DMSO后，如果震荡的话，那么这么大的体积很容易把液体洒出来，导致不准确。

这就是MTT的缺点，所以都换MTS了。
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2011-08-14 22:10:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Melodyzhang

金虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by nicknelson at 2011-08-14 22:10:29:
那我觉得可能有几种原因：1是你加入DMSO后没有震荡，或者由于有培养基所以DMSO浓度小，导致MTT反应产物没有完全溶解，所以测得的数据不准确。2是如果你加入DMSO后，如果震荡的话，那么这么大的体积很容易把液体洒 ...

我是加入DMSO以后用移液枪上下反复推吸的~~~~~
有一个不好意思的问题~~什么是MTS啊？我怎么百度不出来啊？
赞一下 回复此楼
waiting
12楼2011-08-14 22:24:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nicknelson

至尊木虫 (职业作家)
★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-08-15 10:26:47
MTS是MTT的升级版，promega公司的产品。你上公司网页上找就行。我用MTS也出现过调零孔比细胞孔数值还要高的情况，不知道为什么，不过很少见。有人在加MTS时，先把培养基和MTS混合好，再把每个孔换液加进去，好像能避免这种情况，不过这种情况很少见。
赞一下(2人) 回复此楼
13楼2011-08-15 00:16:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Melodyzhang

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wangyu4198 at 2011-08-12 18:24:23:
我们实验室是这样做的 ：我们把MTT之间加到1640培养基里面的 培养基一般100μl，MTT加10μl ，37度培养四小时后，把培养基（含MTT）用1ml注射器 吸掉 ，然后加DMSO（150μl） 之后震荡10min 后 直接测了

可是注射器也会吸走结晶啊？你们是怎么控制的啊？
赞一下 回复此楼
waiting
14楼2011-08-15 12:26:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Melodyzhang

金虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by nicknelson at 2011-08-15 00:16:14:
MTS是MTT的升级版，promega公司的产品。你上公司网页上找就行。我用MTS也出现过调零孔比细胞孔数值还要高的情况，不知道为什么，不过很少见。有人在加MTS时，先把培养基和MTS混合好，再把每个孔换液加进去，好像能 ...

谢谢
回复此楼
waiting
15楼2011-08-15 12:30:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

马龙sweeting

木虫 (正式写手)
★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-08-16 19:22:17
我是这么做的：每孔加20微升MTT，4小时后，把MTT连培养液一起吸出，要吸干净，然后加150微升DMSO，摇床10min，酶标仪检测。  
调零孔比试验孔高可能是因为你的培养液里染了细胞，可能是因为操作不规范等等把细胞带入培养液了，你可以取少量培养液在显微镜下观察一下看看有没有细胞~~
赞一下(2人) 回复此楼
16楼2011-08-16 16:38:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangyu4198

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
14楼: Originally posted by Melodyzhang at 2011-08-15 12:26:56:
可是注射器也会吸走结晶啊？你们是怎么控制的啊？

我们做的是贴壁细胞  用的是带针头的注射器  动作轻柔点
赞一下 回复此楼
17楼2011-08-16 19:13:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梧桐如雪

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
lstt09nk(金币+5): 辛苦 2011-08-17 00:13:21
MTT本身就很不稳定，sigma的还可以。而且实验数据如果不是老手，也不太稳定，重复性差，还不如结晶紫比色呢。我以前还出现过一块板都一种颜色，什么梯度也没有，镜检时很好的。后来直接扣板倒液体（贴壁细胞），烘箱里烘干了再加DMSO，时好时不好，用国药的DMSO不如sigma的好（专门用于细胞的那种）。后来考虑到实验成本，买了同仁的CCK-8代替了MTT。实验数据非常漂亮，很稳定，操作又快又方便。不是做广告，我是真的因为用得好才介绍的，如果有条件可以试一下。虽然这个试剂确实很贵，但是比起重复的做实验，不算浪费了。最重要的是做出来的实验结果经得起反复推敲。
赞一下(1人) 回复此楼
18楼2011-08-16 21:53:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Melodyzhang

金虫 (正式写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 马龙sweeting at 2011-08-16 16:38:36:
我是这么做的：每孔加20微升MTT，4小时后，把MTT连培养液一起吸出，要吸干净，然后加150微升DMSO，摇床10min，酶标仪检测。  
调零孔比试验孔高可能是因为你的培养液里染了细胞，可能是因为操作不规范等等把细胞 ...

可以排除污染问题的，因为我把1640用0.22的膜过了一遍。然后又试了几次，4小时后吸净培养液的和不吸培养液的都试了，空白孔也是吸净与不吸的都试了，可是还是空白孔OD值大~~~~这是为什么啊？
你们有没有试过这样的啊？加MTT前把培养液吸净，然后只加MTT不加培养液，MTT多加一些比如50微升，没过孔底，然后培养4个小时，加入150微升DMSO再测，这样做可行吗？
赞一下 回复此楼
waiting
19楼2011-08-17 14:50:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

马龙sweeting

木虫 (正式写手)
★
看天(金币+1): 鼓励一下 2011-08-18 23:49:37
我从没有这样做过~~不过我觉得这样MTT浓度太大了~~可能会对你的实验结果有影响~~
赞一下(1人) 回复此楼
20楼2011-08-17 17:01:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Melodyzhang 的主题更新
362/4返回列表上一页1234下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 科研孤儿太难了 +12 我4大白菜 2026-08-20 13/650 2026-08-20 20:55 by gltch
[基金申请] 时间戳又变了 +12 wuchongjun 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:05 by spzhao
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +21 yaoyewhu2008 2026-08-20 22/1100 2026-08-20 17:03 by yaoyewhu2008
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+3 snowwithsea 2026-08-19 12/600 2026-08-20 15:56 by lfy8008
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +14 kkkl_v 2026-08-19 15/750 2026-08-20 08:21 by sunzitan
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖？ +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭