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Melodyzhang

金虫 (正式写手)

[求助] MTT法请教

我做的MTT空白孔为什么比有细胞的孔OD值要高很多啊?做空白对照的96孔板是新打开的,加了100微升1640和20微升MTT,37度4小时之后再加150微升DMSO,有细胞的孔处理方法一样,可是测出来的值反而空白孔OD高,到底是哪里除了问题啊?我是做MTT法的新手,哪位大侠能不能帮帮我啊?谢谢
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梧桐如雪

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
lstt09nk(金币+5): 辛苦 2011-08-17 00:13:21
MTT本身就很不稳定,sigma的还可以。而且实验数据如果不是老手,也不太稳定,重复性差,还不如结晶紫比色呢。我以前还出现过一块板都一种颜色,什么梯度也没有,镜检时很好的。后来直接扣板倒液体(贴壁细胞),烘箱里烘干了再加DMSO,时好时不好,用国药的DMSO不如sigma的好(专门用于细胞的那种)。后来考虑到实验成本,买了同仁的CCK-8代替了MTT。实验数据非常漂亮,很稳定,操作又快又方便。不是做广告,我是真的因为用得好才介绍的,如果有条件可以试一下。虽然这个试剂确实很贵,但是比起重复的做实验,不算浪费了。最重要的是做出来的实验结果经得起反复推敲。
18楼2011-08-16 21:53:17
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