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Melodyzhang

金虫 (正式写手)

引用回帖:
17楼: Originally posted by wangyu4198 at 2011-08-16 19:13:18:
我们做的是贴壁细胞  用的是带针头的注射器  动作轻柔点

你们有没有这样试过啊?加MTT前把培养液吸净,然后只加MTT不加培养液,MTT多加一些比如50微升,没过孔底,然后培养4个小时,加入150微升DMSO再测,这样做可行吗?
waiting
21楼2011-08-17 17:33:16
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wangyu4198

铁虫 (初入文坛)

这个还没做过的 不知道做的效果如何
22楼2011-08-18 21:34:22
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)


adslye(金币+1): 感谢交流~祝顺利! 2011-08-21 15:46:24
cck-8没有MTS稳定,你买promega的MTS粉末,5000多,加sigma的pms,自己配置,相当于2毛多钱一个孔。cck-8要将近一块钱。
23楼2011-08-19 10:01:29
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jyy_204

至尊木虫 (职业作家)


adslye(金币+1): 感谢交流~祝顺利! 2011-08-21 15:46:30
把你的细胞浓度放大试试,或者你的MTT可能失效了
有得必有失
24楼2011-08-20 15:43:18
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Melodyzhang

金虫 (正式写手)

引用回帖:
24楼: Originally posted by jyy_204 at 2011-08-20 15:43:18:
把你的细胞浓度放大试试,或者你的MTT可能失效了

我做的细胞浓度大约是每孔10000个,少不少啊?
那你们用的MTT溶液一般4摄氏度保存多长时间就失效了啊?
谢谢
waiting
25楼2011-08-20 18:03:30
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jyy_204

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
25楼: Originally posted by Melodyzhang at 2011-08-20 18:03:30:
我做的细胞浓度大约是每孔10000个,少不少啊?
那你们用的MTT溶液一般4摄氏度保存多长时间就失效了啊?
谢谢

哦  那不少了
我们一般避光放2星期
有得必有失
26楼2011-08-20 20:17:41
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Melodyzhang

金虫 (正式写手)

引用回帖:
26楼: Originally posted by jyy_204 at 2011-08-20 20:17:41:
哦  那不少了
我们一般避光放2星期

哦~~~~那如果超过两星期没有用完的也不再用了吗?
waiting
27楼2011-08-20 21:33:58
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jyy_204

至尊木虫 (职业作家)

其实我们基本现用现配
有得必有失
28楼2011-08-22 08:52:42
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Melodyzhang

金虫 (正式写手)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 马龙sweeting at 2011-08-16 16:38:36:
我是这么做的:每孔加20微升MTT,4小时后,把MTT连培养液一起吸出,要吸干净,然后加150微升DMSO,摇床10min,酶标仪检测。  
调零孔比试验孔高可能是因为你的培养液里染了细胞,可能是因为操作不规范等等把细胞 ...

你们用MTT法测细胞生长曲线的时候,如果把结晶和培养液一起吸出来,吸干净,那做的生长曲线是逐渐上升的吗?有没有出现过吸光度反而下降的情况呢?如果结晶数量随着细胞的生长越来越多,但是每次测的时候确把结晶都吸走了,那会不会就因为这种误差绘制不出生长曲线啊?
waiting
29楼2011-12-29 22:16:47
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匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
30楼2011-12-30 12:38:12
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