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Melodyzhang

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17楼: Originally posted by wangyu4198 at 2011-08-16 19:13:18:
我们做的是贴壁细胞用的是带针头的注射器动作轻柔点

你们有没有这样试过啊？加MTT前把培养液吸净，然后只加MTT不加培养液，MTT多加一些比如50微升，没过孔底，然后培养4个小时，加入150微升DMSO再测，这样做可行吗？

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21楼2011-08-17 17:33:16

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wangyu4198

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这个还没做过的不知道做的效果如何

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22楼2011-08-18 21:34:22

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nicknelson

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adslye(金币+1): 感谢交流~祝顺利！ 2011-08-21 15:46:24

cck-8没有MTS稳定，你买promega的MTS粉末，5000多，加sigma的pms，自己配置，相当于2毛多钱一个孔。cck-8要将近一块钱。

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23楼2011-08-19 10:01:29

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jyy_204

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adslye(金币+1): 感谢交流~祝顺利！ 2011-08-21 15:46:30

把你的细胞浓度放大试试，或者你的MTT可能失效了

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24楼2011-08-20 15:43:18

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Melodyzhang

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24楼: Originally posted by jyy_204 at 2011-08-20 15:43:18:
把你的细胞浓度放大试试，或者你的MTT可能失效了

我做的细胞浓度大约是每孔10000个，少不少啊？
那你们用的MTT溶液一般4摄氏度保存多长时间就失效了啊？
谢谢

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25楼2011-08-20 18:03:30

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jyy_204

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25楼: Originally posted by Melodyzhang at 2011-08-20 18:03:30:

我做的细胞浓度大约是每孔10000个，少不少啊？
那你们用的MTT溶液一般4摄氏度保存多长时间就失效了啊？
谢谢

哦那不少了
我们一般避光放2星期

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26楼2011-08-20 20:17:41

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Melodyzhang

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26楼: Originally posted by jyy_204 at 2011-08-20 20:17:41:
哦那不少了
我们一般避光放2星期

哦~~~~那如果超过两星期没有用完的也不再用了吗？

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27楼2011-08-20 21:33:58

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其实我们基本现用现配

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28楼2011-08-22 08:52:42

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16楼: Originally posted by 马龙sweeting at 2011-08-16 16:38:36:
我是这么做的：每孔加20微升MTT，4小时后，把MTT连培养液一起吸出，要吸干净，然后加150微升DMSO，摇床10min，酶标仪检测。
调零孔比试验孔高可能是因为你的培养液里染了细胞，可能是因为操作不规范等等把细胞 ...

你们用MTT法测细胞生长曲线的时候，如果把结晶和培养液一起吸出来，吸干净，那做的生长曲线是逐渐上升的吗？有没有出现过吸光度反而下降的情况呢？如果结晶数量随着细胞的生长越来越多，但是每次测的时候确把结晶都吸走了，那会不会就因为这种误差绘制不出生长曲线啊？

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29楼2011-12-29 22:16:47

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