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Melodyzhang

金虫 (正式写手)

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[求助] MTT法请教

我做的MTT空白孔为什么比有细胞的孔OD值要高很多啊？做空白对照的96孔板是新打开的，加了100微升1640和20微升MTT，37度4小时之后再加150微升DMSO，有细胞的孔处理方法一样，可是测出来的值反而空白孔OD高，到底是哪里除了问题啊？我是做MTT法的新手，哪位大侠能不能帮帮我啊？谢谢

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1楼 2011-08-12 02:25:17

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爽爽04

铜虫 (初入文坛)

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建议还是将培养基完全吸干再加DMSO摇匀再测哦

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6楼2011-08-13 12:15:08

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浪人利利

金虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 感谢应助，祝顺利！ 2011-08-12 09:48:12
Melodyzhang(金币+1): 2011-08-12 18:51:26

培养液和MTT不要倒掉，直接加DMSO后轻摇，再测一下试试

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2楼2011-08-12 08:45:58

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Melodyzhang

金虫 (正式写手)

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谢谢哦~~~~可是我就是都没有倒掉培养液测的啊~~~，我还害怕含血清的1640会影响OD，所以吸掉旧培养液用PBS漂洗一遍之后，吸净PBS，换为不含血清的1640培养4h，可是测出的结果就是前五天有细胞的孔OD值比空白都要低~~~这到底是什么地方出问题了啊？

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3楼2011-08-12 15:21:55

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wangyu4198

铁虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-08-12 19:07:13

我们实验室是这样做的：我们把MTT之间加到1640培养基里面的培养基一般100μl，MTT加10μl ，37度培养四小时后，把培养基（含MTT）用1ml注射器吸掉，然后加DMSO（150μl）之后震荡10min 后直接测了

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4楼2011-08-12 18:24:23

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