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rickyjay2014

金虫 (正式写手)

[求助] MTT问题求助啊~ 已有2人参与

之前一直做MTT实验,然后新买了MTT粉末配置之后,避光什么的问题都注意的很好了。然后细胞培养后加入作用液后,整个孔板都变成了蓝紫色,请问哪位亲帮助一下,是哪里除了问题,应该是加入作用液后孔板是黄绿色。求助啊!
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天天看文献,好好做实验
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yqbter

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是立刻变成蓝紫色吗?如果是,培养基细胞污染了。
2楼2014-09-10 14:06:29
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zjf710

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
rickyjay2014: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢。 2014-09-23 09:46:36
应该是细胞破碎了或凋亡了,大量琥珀酸脱氢酶泄露至培养基,导致这种情况。
建议:去除培养上清,用终浓度0.5mg/ml的MTT PBS液,加入200或100微升,继续温浴4h。
三人行,必有我师焉
3楼2014-09-11 05:55:33
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失望,希望

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zjf710 at 2014-09-11 05:55:33
应该是细胞破碎了或凋亡了,大量琥珀酸脱氢酶泄露至培养基,导致这种情况。
建议:去除培养上清,用终浓度0.5mg/ml的MTT PBS液,加入200或100微升,继续温浴4h。

请问怎么确定细胞破碎了,琥珀酸脱氢酶泄露。我最近做MTT实验,设置的药物浓度范围很大,但是加了MTT之后,OD值没有梯度变化,都很大
没有到不了的明天
4楼2018-02-01 16:16:04
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失望,希望

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zjf710 at 2014-09-11 05:55:33
应该是细胞破碎了或凋亡了,大量琥珀酸脱氢酶泄露至培养基,导致这种情况。
建议:去除培养上清,用终浓度0.5mg/ml的MTT PBS液,加入200或100微升,继续温浴4h。

希望楼主能够提供帮助
没有到不了的明天
5楼2018-02-01 16:19:19
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