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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物效应评价 » 【求助】关于MTT
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amy666666

木虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】关于MTT 已有4人参与

最近在做MTT，但是发现个问题： 细胞是种在膜上的，当用DMSO溶解甲瓒的时候材料也会溶解。材料是高分子，溶解以后对DMSO粘度肯定会有影响，因此数据也受到影响。请问有没有什么其他的可以溶解甲瓒的溶剂，或者有其他的测试MTT的方法来解决。
还有一个问题是MTT2 4 6 天结果，第四天相对第二天吸光度降低，但是阴性对照没有变化，但第六天比第四天增加很多，比第二天也要增加，对照也增加了。这种情况怎么解释呢？
因为我是做材料的，对MTT的了解还很少，请大家帮忙分析一下，先谢过各位了。
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1楼 2010-10-29 15:01:45
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

mizunoer

铜虫 (正式写手)
★
americanyk(金币+1):Thank you 2010-10-31 17:53:44
amy666666(金币+2): 2010-11-01 10:33:49
shileinjut:欢迎交流！ 2010-11-18 12:45:43
引用回帖:
Originally posted by amy666666 at 2010-10-31 11:14:27:
分子量大概在十万左右
空白准备在孔板中做

那这样做MTT 我觉得没有意义的  一般的材料肯定涨不过孔板的！ 建议还是做live/dead 观察细胞的形貌 和 活死细胞的比例 做一个时间变化！
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8楼2010-10-31 11:45:09
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静天之蓝

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
mtt 的重复性不好 ？那怎么办 其他办法代替？
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10楼2012-10-07 13:55:40
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普通回帖

zhaoting2007

金虫 (小有名气)
★ ★
shileinjut(金币+1):谢谢参与！ 2010-10-30 13:29:56
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！ 2010-10-30 21:23:33
amy666666(金币+2): 2010-10-31 03:54:26
XTT,WST-1等，网上都有介绍，不知道适不适合你的高分子膜。http://www.biobars.cn/a/jishu/xibaoshiyan/20100524/4210.html
对于实验结果问题，MTT重复性本来就不是很好，需要多次重复实验来验证实验结果的正确性，而且膜的溶解应该也会对实验结果产生影响
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2楼2010-10-30 09:53:53
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luckyforrest

金虫 (小有名气)

盐酸异丙醇试试吧

★
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！ 2010-10-30 21:23:40
amy666666(金币+2): 2010-10-31 03:54:44
引用回帖:
Originally posted by amy666666 at 2010-10-29 15:01:45:
最近在做MTT，但是发现个问题： 细胞是种在膜上的，当用DMSO溶解甲瓒的时候材料也会溶解。材料是高分子，溶解以后对DMSO粘度肯定会有影响，因此数据也受到影响。请问有没有什么其他的可以溶解甲瓒的溶剂，或者有其 ...

盐酸异丙醇试试吧，但是溶解的一步时间长一点
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3楼2010-10-30 14:41:24
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mizunoer

铜虫 (正式写手)
★
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！ 2010-10-30 21:23:49
amy666666(金币+2): 2010-10-31 03:55:10
你的膜是脂肪族聚酯吗？膜应该是没有影响的，在500nm多是不会有紫外吸收的！我就这么做的，没有关系的！
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4楼2010-10-30 17:57:26
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amy666666

木虫 (初入文坛)
shileinjut: 2010-11-18 12:45:28
谢谢各位了。
回楼上，我的膜是聚醚砜的，DMSO会溶解，我也做过实验，溶解以后确实会对产生影响。
昨天看文献上说盐酸异丙醇会和胎牛血清产生沉淀，对结果产生影响，不知影响大吗？还有就是看到有用荧光染色直接看细胞数量的文献，不知可以不？
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5楼2010-10-31 04:04:48
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mizunoer

铜虫 (正式写手)
amy666666(金币+2): 2010-10-31 11:14:51
引用回帖:
Originally posted by amy666666 at 2010-10-31 04:04:48:
谢谢各位了。
回楼上，我的膜是聚醚砜的，DMSO会溶解，我也做过实验，溶解以后确实会对产生影响。
昨天看文献上说盐酸异丙醇会和胎牛血清产生沉淀，对结果产生影响，不知影响大吗？还有就是看到有用荧光染色直接 ...

你那个膜分子量多少？如果有影响的话也不应该是你前面所说的粘度，你可以给你的聚合物的DMSO溶液扫一个紫外全谱，看看他的吸收情况！

当然可以通过荧光染色直接观看，就是live/dead吧  可以用钙黄绿素染活细胞，电话吡啶染死细胞！

问下 你铺膜做MTT 你的空白对照是什么？孔板吗？
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6楼2010-10-31 10:55:03
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amy666666

木虫 (初入文坛)
shileinjut:欢迎交流！ 2010-11-18 12:45:38
分子量大概在十万左右
空白准备在孔板中做
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7楼2010-10-31 11:14:27
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amy666666

木虫 (初入文坛)
shileinjut:欢迎交流！ 2010-11-18 12:45:46
引用回帖:
Originally posted by mizunoer at 2010-10-31 11:45:09:



那这样做MTT 我觉得没有意义的  一般的材料肯定涨不过孔板的！ 建议还是做live/dead 观察细胞的形貌 和 活死细胞的比例 做一个时间变化！

谢谢你的建议
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9楼2010-11-01 10:31:41
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