| 查看: 3297 | 回复: 11 | |||
[交流]
【求助/交流】关于MTT检测淋巴细胞活性的若干问题，请教各位大侠~~ 已有8人参与
|
|
最近在做MTT的实验，有些问题想请教各位，先谢谢大家了~~~ 另外不知道我的帖子有没有重复，但这是我自己做的实验，有自己碰到的问题，望大家帮帮小菜。。 1、染毒然后要离心去培养液，但我发现2000转并不能是细胞完全沉到板底，有些孔还是悬着？另外，大家是用什么方法除去培养液的？我发现如果直接倒或者用移液枪吸的话，都会有误差。 2、最后用酶标仪检测的波长是490nm还是570nm？参考波长是什么意思？ 3、调零孔和对照孔的作用是什么？最后的结果怎么表示？ 4、一般检测出来的OD值在什么范围比较可信？如果低了，是不是表示每孔加的细胞数太少了，一般一个空要多少个左右？ 5、还有我的反应体积是100μL（培养基40+细胞悬液50+毒素10），有影响么？有些人用的是200μL。 6、MTT配置是，不用过滤关系大不大？ [ Last edited by hcming on 2010-9-13 at 18:31 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有300人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有7人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 亲核试剂活性大小问题
已经有17人回复
- 【资料】细胞培养的基本条件
已经有64人回复
- 急，帮看看细胞色素脱氢酶活性测定结果
已经有5人回复
- 关于水性环氧、酸酐开环的问题~~~请教各位大侠
已经有9人回复
- 请教关于MTT法时间的问题
已经有7人回复
- MTT法检测hegf生长因子活性系列问题求助
已经有22人回复
- 生物转化生成新产物另加MTT实验检测药理活性，发哪个杂志比较好？
已经有6人回复
- 关于种植黄瓜的若干问题，求各位大侠解答
已经有6人回复
- 淋巴细胞增殖实验（MTT法）中的几个问题
已经有5人回复
- 【求助】10金币请教各位大侠那种表面活性剂的去污能力最强
已经有10人回复
- 【求助】请教各位大侠关于双电层理论的问题
已经有6人回复
- 【求助】有关填料塔普通精馏问题请教各位大侠~
已经有7人回复
- 【求助】关于MTT实验的问题请教
已经有11人回复
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+10):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-09-15 23:41:12
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+10):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-09-15 23:41:12
|
1.染毒后一般不离心，这样很麻烦，而且误差相比会更大。我们一般都是用枪吸，吸的时候要慢，注意下面的结晶紫！ 2.对于DMSO，溶解后呈紫（红）色，490nm有最大吸收值；而对于SDS和酸化异丙醇，则选用570nm。 3.调零孔的作用是因为每一列的板子都存在误差，所以我们在每一列平行样的下面都设置一个调零孔，这样的话，用酶标仪测的时候，它就可以将你每一列的板子进行综合，这样做可以减少误差。 4.MTT实验吸光度最后要在0-0.7之间，超出这个范围就不是直线关系。收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔，（边缘孔用无菌PBS填充）。 5.只要MTT工作浓度为5 mg/ml，即0.5%MTT，反应体积是100还是200，应该无所谓，不过这样的话，你的细胞可能长得慢点，少点。 6.不过滤不行，MTT对细菌非常敏感，我刚做的时候，调零孔的吸光值都很大，后来我在显微镜下发现就是因为染菌，里面有紫色结晶。 |
2楼2010-09-13 18:46:58
3楼2010-09-13 19:17:02
4楼2010-09-15 20:53:08
dhd997
荣誉版主 (文坛精英)
自由人，我型我秀！
- MolEPI: 5
- 应助: 24 (小学生)
- 贵宾: 4.021
- 金币: 22094.4
- 散金: 1968
- 红花: 45
- 沙发: 161
- 帖子: 22410
- 在线: 927.9小时
- 虫号: 500412
- 注册: 2008-02-13
- 性别: GG
- 专业: 生物化工与食品化工
- 管辖: 分子生物
5楼2010-09-15 22:40:14
6楼2010-09-16 08:16:04
7楼2010-10-25 20:58:40
8楼2010-10-25 21:26:14
9楼2012-10-26 00:50:37
10楼2013-10-25 10:36:00
