| 查看: 2605 | 回复: 2 | ||
[求助]
电转化中感受态的制备用到哪些缓冲液 已有1人参与
|
|
一直在做一个革兰氏阴性菌的转座子电击转化。转座效率低啊。感受态的制作都只用水洗细胞，水悬浮最终沉淀，想换电击缓冲液考察下。看过文献其他的菌有用HEPES、PIPES之类的，这些是非离子缓冲液，主要是稳定环境pH吧；还看到说Mg++会激活转座酶什么的，想说是否要加MgCl2，但它是盐，又怕影响电击；还有用蔗糖、MOPES什么的。各种各样的都有，原理还不太清楚。 转座子贵啊，不敢乱试，好迷茫！ 大家电转有用过什么其他缓冲液吗？求推荐求指点！ |
回复此楼» 猜你喜欢
有多少人是今天查系统知道结果的？
已经有17人回复
-
国自然面上复盘~欢迎讨论
已经有6人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有4人回复
-
基金不中，共勉
已经有5人回复
-
看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉……
已经有3人回复
-
我不理解！
已经有23人回复
-
2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战
已经有10人回复
-
系统查不到
已经有10人回复
-
怎么查啊
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- DB3.1高效感受态细胞制备问题
已经有4人回复
- 做转化时，感受态用多大的量比较好呢
已经有15人回复
- 电转化DH5α感受态
已经有16人回复
- 大质粒转化 感受态细胞问题
已经有23人回复
- 请问制备的电转化的感受态细胞可以用于化学转化操作吗？
已经有3人回复
- 关于质粒扩增和感受态转化
已经有5人回复
- 毕赤酵母用于电转化制备感受态细胞步骤
已经有13人回复
- 感受态细胞转化后的存放问题
已经有8人回复
- 电转时电压上不去
已经有14人回复
- 感受态细胞转化
已经有17人回复
- 一个关于感受态转化效率的问题
已经有11人回复
- 急求酿酒酵母的电转感受态制备方法和转化方法
已经有13人回复
- 乳酸菌感受态细胞的制备
已经有6人回复
- 毕赤酵母转化表达
已经有13人回复
- 感受态的制备及转化？
已经有13人回复
- 【求助/交流】质粒的转化体积为什么不能超过感受态的十分之一
已经有16人回复
- 【分享】农杆菌感受态制备和转化方法
已经有19人回复
- 【求助/交流】质粒转化枯草杆菌感受态原理
已经有4人回复
- 【求助/交流】关于大肠杆菌感受态细胞保存的问题
已经有7人回复
- 【专题】------------------感受态、转化专题------------------
已经有24人回复
- 【求助/交流】求助：PXO99感受态的制备和电转化
已经有5人回复
- 【求助/交流】求助：酵母感受态细胞的制备
已经有9人回复
- 电转化注意事项
已经有14人回复
馨-馨
银虫 (小有名气)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 135.4
- 散金: 34
- 帖子: 115
- 在线: 55.3小时
- 虫号: 1390789
- 注册: 2011-09-05
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2014-08-11 14:24:02
|
真的一定会击穿？馨馨有没听过所谓的低渗溶液环境有利于感受态细胞的制作。是不是加低浓度的MgCl2就会没事。The EZ-Tn5 Transposome can be electroporated into living cells where the EZ-Tn5 Transposase is activated by Mg2+ in the host’s cellular environment resulting in random insertion of the EZ-Tn5 Transposon into the host genomic DNA. 我的转座子说明书里面有这么一句话，所以很疑心是否要用到Mg2+ |
3楼2014-08-11 15:24:56
