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kingfabear

新虫 (初入文坛)

[求助] 电转化中感受态的制备用到哪些缓冲液 已有1人参与

一直在做一个革兰氏阴性菌的转座子电击转化。转座效率低啊。感受态的制作都只用水洗细胞,水悬浮最终沉淀,想换电击缓冲液考察下。看过文献其他的菌有用HEPES、PIPES之类的,这些是非离子缓冲液,主要是稳定环境pH吧;还看到说Mg++会激活转座酶什么的,想说是否要加MgCl2,但它是盐,又怕影响电击;还有用蔗糖、MOPES什么的。各种各样的都有,原理还不太清楚。
转座子贵啊,不敢乱试,好迷茫!
大家电转有用过什么其他缓冲液吗?求推荐求指点!
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馨-馨

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kingfabear(dllchina代发): 金币+1, 鼓励交流 2014-08-11 21:19:01
电转化感受态,需要用到的是超纯水,和10%的甘油。不要额外加盐,会击穿的。。
2楼2014-08-11 14:24:02
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