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ydsc526

铜虫 (初入文坛)

[求助] 酶活力怎么计算的问题 已有1人参与

求助:
定义:1min,水解1uM底物所需的酶量为1U,
实验过程是:底物浓度为0.4mM,反应体系是5ml底物加50ul粗酶液,37度水浴反应120min,测OD变化,没加酶液OD是0.357,加酶液OD是0.242,标曲是y=0.0008x+0.0171,求酶活力(U/ml)。
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ydsc526

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-07-30 23:37:15
1.将OD差值带入标准曲线中,算出你底物的消耗量(最终单位是umol)
2.酶活力(u/ml)=底物的消耗量(umol)*粗酶液稀释倍数/粗酶液添加量(ml)*反应时间(min)

谢谢,但是这样算出来值很小,就算把反应体系中的底物都消耗完了也不到1U,我想知道这种方法是不是不太对?
3楼2014-07-31 12:45:16
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luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
ydsc526: 金币+5, ★有帮助 2014-07-31 12:48:35
1.将OD差值带入标准曲线中,算出你底物的消耗量(最终单位是umol)
2.酶活力(u/ml)=底物的消耗量(umol)*粗酶液稀释倍数/粗酶液添加量(ml)*反应时间(min)
大家相互帮助哈
2楼2014-07-30 23:37:15
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luwei13566

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ydsc526 at 2014-07-31 12:45:16
谢谢,但是这样算出来值很小,就算把反应体系中的底物都消耗完了也不到1U,我想知道这种方法是不是不太对?...

只要是酶都是用这种方法算酶活的。方法没有任何问题
大家相互帮助哈
4楼2014-07-31 15:38:32
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