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ydsc526

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[求助] 酶活力怎么计算的问题已有1人参与

求助：
定义：1min,水解1uM底物所需的酶量为1U，
实验过程是：底物浓度为0.4mM，反应体系是5ml底物加50ul粗酶液，37度水浴反应120min，测OD变化，没加酶液OD是0.357,加酶液OD是0.242,标曲是y=0.0008x+0.0171,求酶活力（U/ml）。

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1楼 2014-07-30 17:04:09

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luwei13566

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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ydsc526: 金币+5, ★有帮助 2014-07-31 12:48:35

1.将OD差值带入标准曲线中，算出你底物的消耗量（最终单位是umol）
2.酶活力（u/ml）=底物的消耗量（umol）*粗酶液稀释倍数/粗酶液添加量（ml）*反应时间（min）

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大家相互帮助哈

2楼2014-07-30 23:37:15

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ydsc526

铜虫 (初入文坛)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-07-30 23:37:15
1.将OD差值带入标准曲线中，算出你底物的消耗量（最终单位是umol）
2.酶活力（u/ml）=底物的消耗量（umol）*粗酶液稀释倍数/粗酶液添加量（ml）*反应时间（min）

谢谢，但是这样算出来值很小，就算把反应体系中的底物都消耗完了也不到1U，我想知道这种方法是不是不太对？

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3楼2014-07-31 12:45:16

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