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刘楚怡

新虫 (初入文坛)

[求助] 做溶出曲线的对照进行紫外测量时的一个问题 已有2人参与

我正在做一个项目的四条溶曲(pH:1.0;4.5;6.8;水以及0.2%吐温80),某次配好了1.2、4.5、和6.8的三个介质的对照溶液但由于时间关系当时没有测紫外就放到冰箱里,过了三四天之后把他们拿出来降至室温后分别超声约十分钟后用前几天的介质做空白进行紫外测量(300nm),大家知道每换一次测量介质就要进行一次校零对吧,以前我们同时做四个介质的溶出的时候为了方便就只用其中一个pH的介质校零测所有的样品也没出什么问题,这次1.0的测出来比较正常稍低(0.60-0.61左右),而6.8的测出来就很低(0.54左右),我怀疑是6.8的介质放久了有问题(能看到部分白色絮状物,但去到比色皿中进行校零的没有)于是用1.0的重新校过再测结果就比较正常了。但问题是两种介质校零后得到的全波长图谱里显示在300nm处几乎都没有吸收(吸光度只有10^-4、10^-5),不知是如何产生了这么大的影响,6.8的介质里白色物又有可能是什么,请各位高手不吝赐教!
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王玉峰717

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能原因如下:
1.聚氧乙烯山梨醇酐硬脂酸酯,含有部分未反应完的脂肪酸,而脂肪类物质在低温下就会凝固,就像猪油一样,所以你的吐温变浑浊是正常的。
2.个人觉得只有pH6.8聚集原因是:磷酸盐缓冲液的离子强度最高,吐温80在一定的浓度范围内,由于电荷效应,会促进胶束的形成或者排列形式的转换,导致胶束形状会发生一些变化,胶束是带电荷的,离子强度可能会导致胶束发生变化。本人每次都是现配现用,这个我只是推断。
3.是不是有混入杂质了。
走别人的路,让别人无路可走。
2楼2014-07-28 08:31:52
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刘楚怡

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 王玉峰717 at 2014-07-28 08:31:52
可能原因如下:
1.聚氧乙烯山梨醇酐硬脂酸酯,含有部分未反应完的脂肪酸,而脂肪类物质在低温下就会凝固,就像猪油一样,所以你的吐温变浑浊是正常的。
2.个人觉得只有pH6.8聚集原因是:磷酸盐缓冲液的离子强度最高 ...

感谢回答。有一个问题就是吐温不是靠亲水和疏水基团形成胶束的吗,高的离子浓度会对它产生影响吗。
3楼2014-07-28 13:43:22
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王玉峰717

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 刘楚怡 at 2014-07-28 13:43:22
感谢回答。有一个问题就是吐温不是靠亲水和疏水基团形成胶束的吗,高的离子浓度会对它产生影响吗。...

不同表面活性剂有其自己的临界胶束浓度,除与结构和组成有关外,还可以随外部条件变化而不同,如温度、溶液的pH及电解质等均影响临界胶束浓度的大小。
pH、电解质这三点你这不同pH的介质均不同,温度变化跟你冷藏有关。都是影响因素。
走别人的路,让别人无路可走。
4楼2014-07-28 15:24:32
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wangyc3

至尊木虫 (著名写手)

新药研发

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不知道你的药物在不同PH介质中的波长是否一样,使用不同介质测定需要用相应的波长等,且应该使用该介质作为空白调零再测定,不管四种介质间是否有差异,这一块不应寻方便
青春无悔
5楼2014-07-30 23:03:16
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