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tyyfhappy

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[求助] 关于overlapping相关求助已有1人参与

我用普通的taq酶，把两个片段连了起来，今天导师过来说，普通的taq酶p的片段最后会有一个A粘性末端，理论上这两个片段都是连不起来的，但是我做overlapping的十二个片段都成功连起来啦。。。导师叫我重做。。但我想不通怎么会连上去，最后一位A都没互补配对，根本无法延伸才对。。求教各位大虾

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1楼 2014-07-19 17:22:58

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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

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专业: 细胞信号转导
管辖: 分子生物

【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-07-22 18:25:51

如果你也是用Taq酶融合的话，的确会有一个A，如果你是用高保真酶融合的话那个A不配对会被切除

虽然最后一位A没互补配对，但是还是有一定概率延伸的，如果照你说的根本无法延伸的话，那也就不会产生突变了，但事实上Taq酶很容易产生突变，在突变位置处与模板不配对，但还是照样延伸了不是

学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com

2楼2014-07-19 22:51:20

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