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swach

铁虫 (小有名气)

[求助] 大神帮忙看看基因组检测是什么问题?有什么解决方法?已有2人参与

昨天提的基因组,用的是omega的试剂盒。因为一直提的不好,同学有一个师姐留下的试剂盒,也是omega的,我打客服问了一下,说是可以纯化DNA,我就用了。在用omega土壤提取试剂盒提完基因组之后,我用这个omega MicroElute DNA Clean-Up Ki试剂盒把基因组进行纯化。紫外检测结果见图,A260/230达到了1.9,之前从来没有高过0.1的,是什么问题!有什么方法可以补救吗?因为要去测高通量,所以很着急,大家帮忙啦!

大神帮忙看看基因组检测是什么问题?有什么解决方法?
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grase

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【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流。 2014-07-18 14:43:09
挺好的,260/230一般要超过1.5才好。
2楼2014-07-18 12:57:13
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swach

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by grase at 2014-07-18 12:57:13
挺好的,260/230一般要超过1.5才好。

是吗?我一直以为低了好呢。
3楼2014-07-18 13:38:42
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luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-07-18 14:43:17
1.A260/A230主要表征小分子糖,盐类,有机溶剂的污染,将你的核酸多用70%乙醇漂洗两次,之后彻底晾干乙醇能提高该数值,最好能>2.0,一般1.5以上都可以了。
2.你图上第一个样品蛋白没有除净
大家相互帮助哈
4楼2014-07-18 14:05:17
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swach

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-07-18 14:05:17
1.A260/A230主要表征小分子糖,盐类,有机溶剂的污染,将你的核酸多用70%乙醇漂洗两次,之后彻底晾干乙醇能提高该数值,最好能>2.0,一般1.5以上都可以了。
2.你图上第一个样品蛋白没有除净

那之前我们提的A260/230都在0.1一下,是不是代表核酸污染很严重啊?这次核酸我用乙醇洗了四次了,还是不好。还有,如果有腐殖酸的影响的话,260/280以及260/230是怎么变化呢?我一直弄不懂这个,之前一直都只看260/280的比值。
5楼2014-07-18 16:50:55
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luwei13566

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by swach at 2014-07-18 16:50:55
那之前我们提的A260/230都在0.1一下,是不是代表核酸污染很严重啊?这次核酸我用乙醇洗了四次了,还是不好。还有,如果有腐殖酸的影响的话,260/280以及260/230是怎么变化呢?我一直弄不懂这个,之前一直都只看260 ...

乙醇漂洗后乙醇晾彻底了没??
大家相互帮助哈
6楼2014-07-18 19:47:20
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swach

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-07-18 19:47:20
乙醇漂洗后乙醇晾彻底了没??...

应该是晾干了吧,室温下开盖放了2分钟才做的下一步
7楼2014-07-18 19:59:59
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luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-07-19 16:53:05
用乙醇漂洗可不像回收和纯化试剂盒的柱子那样可以空离,你最好还是多晾一会或者直接真空干燥
大家相互帮助哈
8楼2014-07-18 20:45:04
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swach

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-07-18 20:45:04
用乙醇漂洗可不像回收和纯化试剂盒的柱子那样可以空离,你最好还是多晾一会或者直接真空干燥

恩,我想问问蛋白污染是不是就是表现在260/280低呢
9楼2014-07-18 21:06:19
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luwei13566

木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by swach at 2014-07-18 21:06:19
恩,我想问问蛋白污染是不是就是表现在260/280低呢...

260/280低于1.8属于有蛋白残留
大家相互帮助哈
10楼2014-07-18 21:49:02
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