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嗰叽嗰叽

金虫 (小有名气)

[求助] 新提的细菌基因组作为模板,P一段2100多的片段,请大神帮忙分析下。多谢。

MARKER从上到下是4500,3000,2000,1200,800,500,200
从左到右模板量和退火温度分别为1号:0.5ul  60度,
                              2号:0.5ul  61度,
                              3号:1ul     60度,
                              4号:1ul     61度。

最右边为提取的基因组。
泡胶上样量PCR结果为5ul,marker 5ul,  基因组为2ul加2ul  loading buffer。
请主要分析下为什么MARKER和PCR结果又那么多托的条带带。
本人新手,请多多帮忙,多谢了
新提的细菌基因组作为模板,P一段2100多的片段,请大神帮忙分析下。多谢。
2014.1.14PCR和提的基因组.jpg

[ Last edited by 嗰叽嗰叽 on 2014-1-15 at 11:00 ]
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Wearehereandwearewating.
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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嗰叽嗰叽: 金币+2, 有帮助 2014-01-15 11:04:00
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2014-01-15 17:45:04
拖尾主要是胶的问题,再一个你的电压估计有点大,造成拖尾,你可以适当把电压调低点。
hehe
2楼2014-01-15 11:00:54
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嗰叽嗰叽

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-01-15 11:00:54
拖尾主要是胶的问题,再一个你的电压估计有点大,造成拖尾,你可以适当把电压调低点。

请问是胶放的琼脂糖多了还是什么问题,电压下次我调低点。
还有我的基因组条带下面有两个不亮的条带,造成它们出现的原因是什么,我用的是细菌基因组提取试剂盒提的,请指教。
Wearehereandwearewating.
3楼2014-01-15 11:03:46
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 嗰叽嗰叽 at 2014-01-15 11:03:46
请问是胶放的琼脂糖多了还是什么问题,电压下次我调低点。
还有我的基因组条带下面有两个不亮的条带,造成它们出现的原因是什么,我用的是细菌基因组提取试剂盒提的,请指教。...

不是多的问题估计是TAE缓冲液的问题,建议你把槽子里的缓冲液换一换。
hehe
4楼2014-01-15 11:08:27
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