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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 新提的细菌基因组作为模板，P一段2100多的片段，请大神帮忙分析下。多谢。
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嗰叽嗰叽

金虫 (小有名气)

[求助] 新提的细菌基因组作为模板，P一段2100多的片段，请大神帮忙分析下。多谢。

MARKER从上到下是4500,3000,2000,1200,800,500,200
从左到右模板量和退火温度分别为1号：0.5ul  60度，
                              2号：0.5ul  61度，
                              3号：1ul     60度，
                              4号：1ul     61度。

最右边为提取的基因组。
泡胶上样量PCR结果为5ul,marker 5ul,  基因组为2ul加2ul  loading buffer。
请主要分析下为什么MARKER和PCR结果又那么多托的条带带。
本人新手，请多多帮忙，多谢了
新提的细菌基因组作为模板，P一段2100多的片段，请大神帮忙分析下。多谢。
2014.1.14PCR和提的基因组.jpg

[ Last edited by 嗰叽嗰叽 on 2014-1-15 at 11:00 ]
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Wearehereandwearewating.
1楼 2014-01-15 10:57:28
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
嗰叽嗰叽: 金币+2, ★有帮助 2014-01-15 11:04:00
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2014-01-15 17:45:04
拖尾主要是胶的问题，再一个你的电压估计有点大，造成拖尾，你可以适当把电压调低点。
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hehe
2楼2014-01-15 11:00:54
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嗰叽嗰叽

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-01-15 11:00:54
拖尾主要是胶的问题，再一个你的电压估计有点大，造成拖尾，你可以适当把电压调低点。

请问是胶放的琼脂糖多了还是什么问题，电压下次我调低点。
还有我的基因组条带下面有两个不亮的条带，造成它们出现的原因是什么，我用的是细菌基因组提取试剂盒提的，请指教。
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Wearehereandwearewating.
3楼2014-01-15 11:03:46
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 嗰叽嗰叽 at 2014-01-15 11:03:46
请问是胶放的琼脂糖多了还是什么问题，电压下次我调低点。
还有我的基因组条带下面有两个不亮的条带，造成它们出现的原因是什么，我用的是细菌基因组提取试剂盒提的，请指教。...

不是多的问题估计是TAE缓冲液的问题，建议你把槽子里的缓冲液换一换。
赞一下(1人) 回复此楼
hehe
4楼2014-01-15 11:08:27
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