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关于BstEII酶切位点可变碱基的问题
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BstEII的酶切序列为G’GTNACC，中间有个可变碱基N 我用BstEII酶切pCAMBIA1301和目的片段，连接构好载体后酶切检测正确 测序结果：其它都正确，但是BstEII的可变碱基由原先设计引物时的GGTTACC变为GGTGACC，而pCAMBIA1301上BstEII的序列为GGTGACC，与测序的竟然是一样，测序测了几次都是这样，当初设计引物考虑不周，没有与载体上的酶切序列一致 难道这个可变碱基自己变成了1301上原来的碱基，我设计引物可是变了的，这是什么原因？ |
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