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爬爬大蜗牛

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[求助] 关于BstEII酶切位点可变碱基的问题

BstEII的酶切序列为G’GTNACC,中间有个可变碱基N
我用BstEII酶切pCAMBIA1301和目的片段,连接构好载体后酶切检测正确
测序结果:其它都正确,但是BstEII的可变碱基由原先设计引物时的GGTTACC变为GGTGACC,而pCAMBIA1301上BstEII的序列为GGTGACC,与测序的竟然是一样,测序测了几次都是这样,当初设计引物考虑不周,没有与载体上的酶切序列一致

难道这个可变碱基自己变成了1301上原来的碱基,我设计引物可是变了的,这是什么原因?
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