24小时热门版块排行榜    

查看: 3013  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

tewithte

新虫 (初入文坛)

[求助] southern杂交--以含有探针的质粒杂交,为什么能杂出两条带。 已有1人参与

杂交是使用了含有探针序列的质粒进行杂交对比,质粒和探针上都是应该没有酶切位点的,但是杂出了两条带,而且有一条特别亮,位置大约在500-1000bp左右,是不是浓度很高的DNA也可以非特异性杂交上?用的是罗氏DIG试剂盒。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bxyoung

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by wopopwz123 at 2014-10-20 13:47:52
你邮箱是多少,我给你发一个过程资料...

好的,谢谢!bxyoung@163.com
天道酬勤
7楼2014-10-21 10:18:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

bingbing2001

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-07-02 12:26:37
gyesang: 应助指数+1 2014-07-15 22:24:50
你给的信息太少,不知道该怎么帮你。
既然用质粒杂交,应该考虑到质粒的三种不同形态,可能位置会不同,可以考虑用酶切后的质粒杂交。
不知道能否解决你的问题。
2楼2014-07-02 08:45:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wopopwz123

捐助贵宾 (小有名气)

你好,你这个问题很明显,如果是质粒与探针进行杂交的话,会出现3条带,线性、环形和开环的三个结构。如果是酶切好的,应该会出现一条带,但是你的酶切质粒是否纯化?如果纯化不干净,还会有这样的情况。过几天我会讲一个视频来说一下southern,各种各样的问题都会在里面讲,我经常做分子杂交。
3楼2014-07-29 02:15:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

豆豆龙9052

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wopopwz123 at 2014-07-29 02:15:31
你好,你这个问题很明显,如果是质粒与探针进行杂交的话,会出现3条带,线性、环形和开环的三个结构。如果是酶切好的,应该会出现一条带,但是你的酶切质粒是否纯化?如果纯化不干净,还会有这样的情况。过几天我会 ...

我做的是斑点杂交,探针用的是随机引物法,也是用罗氏的kit I ,用构建的质粒PCR产物来标记,目的片段为689bp左右,后来做了很多次都是只能检测到质粒,阳性样品无法检测到,愁苦~~
4楼2014-07-30 10:00:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 299求调剂 +6 △小透明* 2026-03-17 6/300 2026-03-21 02:42 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕英一数二306 +7 z1z2z3879 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:48 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +8 小材化本科 2026-03-18 8/400 2026-03-20 23:16 by JourneyLucky
[考研] 323求调剂 +3 洼小桶 2026-03-18 3/150 2026-03-20 22:54 by JourneyLucky
[考研] 287求调剂 +7 晨昏线与星海 2026-03-19 8/400 2026-03-20 22:19 by JourneyLucky
[考研] 求调剂,一志愿:南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +4 @taotao 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:14 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +5 脱颖而出 2026-03-16 14/700 2026-03-20 09:30 by kkcoco25
[考研] 生物学调剂招人!!! +3 山海天岚 2026-03-17 4/200 2026-03-19 21:34 by 怎么释怀
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 6/300 2026-03-19 17:18 by fei626-918
[考研] 材料与化工求调剂 +7 为学666 2026-03-16 7/350 2026-03-19 14:48 by 尽舜尧1
[考研] 328求调剂,英语六级551,有科研经历 +4 生物工程调剂 2026-03-16 12/600 2026-03-19 11:10 by 生物工程调剂
[考研] 0703化学调剂 +3 妮妮ninicgb 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:29 by macy2011
[考研] 304求调剂 +4 ahbd 2026-03-14 4/200 2026-03-16 16:48 by 我的船我的海
[考研] 321求调剂 +5 大米饭! 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
[考研] 080500,材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 复试调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
信息提示
请填处理意见