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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】如何确定一段基因的位置在染色体还是在质粒上？
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小丁山

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】如何确定一段基因的位置在染色体还是在质粒上？ 已有8人参与

一株刚刚筛出来的干酪乳杆菌，想确定其产胞外多糖基因的位置是否位于质粒，望高手指点
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1楼 2010-09-26 09:40:01
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rtli1672

金虫 (著名写手)

质粒提出来做PCR

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可以分别提取质粒和基因组DNA，分别作PCR检测就可以了
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2楼2010-09-26 09:48:46
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小丁山

铜虫 (小有名气)
[quote]Originally posted by rtli1672 at 2010-09-26 09:48:46:
可以分别提取质粒和基因组DNA，分别作PCR检测就可以了
如何检测呢，是以什么作为模板

[ Last edited by 小丁山 on 2010-9-26 at 09:55 ]
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3楼2010-09-26 09:54:25
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rtli1672

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
按照你要检测的那个基因序列设计引物，分别以质粒和基因组DNA为模板，做PCR，产物进行琼脂糖凝胶电泳，有目的带的就是有基因的部分。当然，如果你实验室条件允许的话，也可以直接把质粒或DNA送去公司测序，测序引物用你自己的特异引物就行了
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4楼2010-09-26 10:06:07
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banhf

新虫 (初入文坛)
★ ★
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silicare(金币+1): 2010-09-27 11:58:03
据我所知，有时提取质粒时会有少量基因组DNA也被提取出来。
因为我们知道理论上只要有一条模板链就可以得到PCR产物，怎么保证提取出的质粒绝对不包含基因组DNA呢？求解
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5楼2010-09-27 10:48:14
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shan-sa

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
做SOUTHERN杂交，定位看看就知道了
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6楼2010-09-27 11:07:06
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zking5129

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
貌似有质粒消除实验，虽然没做过，不过楼主可以尝试一下。
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7楼2010-09-28 15:04:01
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06052105

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
同位素标记法试一下！！
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和自己的昨天比，只要有进步就行。天很宽，地很广，别人有路我有桥！
8楼2010-09-28 16:22:33
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小丁山

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by shan-sa at 2010-09-27 11:07:06:
做SOUTHERN杂交，定位看看就知道了

那以什么作为模板进行杂交 这产糖基因还是未知呢 如何杂交啊
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9楼2010-10-10 13:51:56
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shan-sa

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
哦，如果基因未知就没有办法做探针了...
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10楼2010-10-10 14:12:22
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