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焦虑的虫虫虫

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助DGGE分子实验操作，来分析下我的图是肿么了 已有2人参与

每次跑胶都扭曲，是灌完梯度胶水封时出现的问题么，水封时总是会把上面的胶冲的七荤八素，求指导。看看我的DGGE图是否正常，应该有哪些改进，90V,10小时。最后一次的胶的条带都在下面，怎么让它能在胶的中间，变形范围，40%-70%。230bp左右，16S V3序列。

求助DGGE分子实验操作，来分析下我的图是肿么了
最近一次图2.jpg


求助DGGE分子实验操作，来分析下我的图是肿么了-1
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1楼 2014-06-30 11:15:09
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
焦虑的虫虫虫(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-06-30 20:58:52
解决办法已经上传到我的云盘了，去下载查看吧
链接：http://pan.baidu.com/s/1o6iDMe2 密码：5ed9
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
2楼2014-06-30 11:48:49
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瓜尔佳氏鱼鱼

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-07-15 23:37:08
1）r染色效果确实不太好，建议可以一下Genfinder。
2）点样时旁边的孔建议不要点，电压不稳，就会造成跑出来的条带是跑偏的。
3) 你的图奇怪在没有显示出点样空，我觉得是染色的问题，是不是染色液放的太少，没有浸没胶。此外还需避光在摇床上震荡30min以上的。
4）你说的灌缓冲液的时候里面的样品会冲出来，是操作的问题，在没有点样之前要先用缓冲液灌洗胶孔，之后再点样，最后注缓冲液的时候应该从胶的另一面灌入，避免冲洗胶孔。
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过上等人的生活,尽中等人的劳力,享下等人的情欲。
3楼2014-07-04 14:41:25
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