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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 有关2D电泳样品制备的问题
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七小艾

新虫 (小有名气)

[求助] 有关2D电泳样品制备的问题 已有1人参与

各位大神，一不小心悲剧，课题变成了蛋白质组学
要用2D电泳，以前从没学过电泳，现在处于看文献看书阶段，遇到的第一个问题：
样品制备是不是一定要除DNA、RNA？因为书上说DNA、RNA会使IEF胶条酸性端聚焦不良，也可能在银染得胶上产生明显的背景，如果使用考马斯亮蓝染色法，是不是就可以不用除DNA、RNA？我看的一篇文献里没提到处DNA、RNA这一步。
各位大神请帮忙解答一下，感激不尽
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1楼 2014-06-29 16:44:23
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proteomicszj

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
七小艾: 金币+5, ★有帮助 2014-07-27 14:50:37
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-08-02 10:47:58
样品制备是不是一定要除DNA、RNA？
当然。样品制备过程中一般包括了去除DNA和RNA，可能没有指出而已。
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2楼2014-07-26 12:30:50
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七小艾

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by proteomicszj at 2014-07-26 12:30:50
样品制备是不是一定要除DNA、RNA？
当然。样品制备过程中一般包括了去除DNA和RNA，可能没有指出而已。

多谢，现在看明白了，蛋白经过沉淀已经除去其中的DNA、RNA了。
只是还有个问题，是不是整个2D电泳过程中的所有试剂都要用进口的？包括蛋白沉淀时用到的丙酮、TCA等吗？细胞裂解时用到的裂解液（尿素、CHAPS等）也要用进口的吗？还是只要从水化开始的试剂用进口的就可以？
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3楼2014-07-27 14:48:49
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proteomicszj

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
youlinglyw: 金币+3, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-08-02 10:48:06
七小艾: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-08-04 15:34:42
尿素、CHAPS: IEF时用到，要求纯度较高。CHAPS稍微贵点，尿素比较便宜。
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4楼2014-08-02 09:10:52
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七小艾

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by proteomicszj at 2014-08-02 09:10:52
尿素、CHAPS: IEF时用到，要求纯度较高。CHAPS稍微贵点，尿素比较便宜。

多谢，试剂已经订了，试剂到了就试试
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5楼2014-08-04 15:34:22
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tangbao66

银虫 (小有名气)
楼主现在是高手了吧，我正在做这个，多指教啊

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6楼2015-11-11 23:29:26
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