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yanbixing

新虫 (初入文坛)

[求助] western blot 已有3人参与

各位大神:我做Western blot 时, 电泳结束后,凝胶做考马斯亮蓝染色,看不到任何的蛋白条带,请问是考马斯亮蓝染色不够敏感呢还是我没有提到蛋白呢?
                另外,我在电泳时,样品和上样缓冲液在经过压缩胶后没有成一条直线,哪些情况会导致这种结果呀?
                 谢谢各位啦!
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ghqiu09

禁虫 (正式写手)


感谢参与,应助指数 +1
yanbixing(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-28 12:57:48
本帖内容被屏蔽

3楼2014-06-27 23:00:39
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查看全部 5 个回答

lone007

捐助贵宾 (正式写手)

问问你师兄啊
做一个合格的普通人
2楼2014-06-27 16:47:07
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茂林修竹7

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yanbixing(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-06-28 12:57:31
考马斯亮蓝染色的灵敏度肯定不如直接做Western Blot,如果你的蛋白有标签或者有抗体,你可以直接做一下western 检测。
另外提高上样量,先确定是否蛋白提取出问题了。
样品在跑胶过程中,不能聚成一条线,我也认为是loading buffer的量不够。
将欲取之必先与之
4楼2014-06-28 10:53:22
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luca5s

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
western可以检测出含量少的目的蛋白,考马斯亮蓝没看到不说明western没有。
咳咳
5楼2014-06-29 09:07:34
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