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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » western blot
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yanbixing

新虫 (初入文坛)

[求助] western blot 已有3人参与

各位大神：我做Western blot 时， 电泳结束后，凝胶做考马斯亮蓝染色，看不到任何的蛋白条带，请问是考马斯亮蓝染色不够敏感呢还是我没有提到蛋白呢？
                另外，我在电泳时，样品和上样缓冲液在经过压缩胶后没有成一条直线，哪些情况会导致这种结果呀？
                 谢谢各位啦！
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1楼 2014-06-27 16:11:11
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ghqiu09

禁虫 (正式写手)
★
感谢参与，应助指数 +1
yanbixing(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-28 12:57:48
本帖内容被屏蔽
3楼2014-06-27 23:00:39
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lone007

捐助贵宾 (正式写手)
问问你师兄啊
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做一个合格的普通人
2楼2014-06-27 16:47:07
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茂林修竹7

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yanbixing(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-06-28 12:57:31
考马斯亮蓝染色的灵敏度肯定不如直接做Western Blot，如果你的蛋白有标签或者有抗体，你可以直接做一下western 检测。
另外提高上样量，先确定是否蛋白提取出问题了。
样品在跑胶过程中，不能聚成一条线，我也认为是loading buffer的量不够。
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将欲取之必先与之
4楼2014-06-28 10:53:22
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luca5s

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
western可以检测出含量少的目的蛋白，考马斯亮蓝没看到不说明western没有。
赞一下(1人) 回复此楼
咳咳
5楼2014-06-29 09:07:34
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