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lhjun1987

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] western blot 收细胞 已有4人参与

请教关于细胞收集的问题,我做western之前细胞一般都是养在24孔板中,收细胞的过程如下:吸弃培养基,加入PBS清洗,吸弃PBS,每孔加入50微升裂解液,然后用枪头刮(因为我是隔天收的,所以不能放在冰上),在刮的过程中会产生很多气泡,导致最后收集的裂解液体积不一,各位大神你们是如何收集24孔板细胞的呢,能够使最后的细胞量保持一致,谢谢!!!
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生命中的每一天都是那么的美好
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
youlinglyw: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-07-03 11:57:45
lhjun1987: 金币+4, ★★★很有帮助 2014-12-15 20:14:09
只有测样品的蛋白质浓度了
2楼2014-06-29 10:37:01
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biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚:专业/专注/专心

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
youlinglyw: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-07-03 11:57:38
lhjun1987: 金币+3 2014-12-15 20:14:00
主要是要保证上样时总蛋白量一直就可以了。
年末优惠荧光定量pcr、WB、ELISA技术服务一律六折!交流锤炼知识,用心构筑桥梁,以更优质的产品及技术服务助力科研;QQ:2513165427;Email:b
3楼2014-07-03 10:12:13
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pudding9696

无虫 (小有名气)

youlinglyw: 应助指数-1, 屏蔽内容, 违规存档, 广告 2014-07-04 15:16:05
本帖内容被屏蔽

4楼2014-07-04 14:49:15
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liushuminlsm

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
lhjun1987: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-12-15 20:13:41
我们一般上清液是不弃掉的,和消化后的细胞收集到同一管里,离心后再加入裂解液,这样体积会比较均一。
5楼2014-07-11 11:33:28
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古园锦

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by liushuminlsm at 2014-07-11 11:33:28
我们一般上清液是不弃掉的,和消化后的细胞收集到同一管里,离心后再加入裂解液,这样体积会比较均一。

楼主你好,请问你们实验室一直是这样处理的么,效果怎么样?还请回复,多谢!
changeyourself
6楼2015-08-27 11:11:28
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