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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » western blot 收细胞
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lhjun1987

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] western blot 收细胞 已有4人参与

请教关于细胞收集的问题，我做western之前细胞一般都是养在24孔板中，收细胞的过程如下：吸弃培养基，加入PBS清洗，吸弃PBS，每孔加入50微升裂解液，然后用枪头刮（因为我是隔天收的，所以不能放在冰上），在刮的过程中会产生很多气泡，导致最后收集的裂解液体积不一，各位大神你们是如何收集24孔板细胞的呢，能够使最后的细胞量保持一致，谢谢！！！
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生命中的每一天都是那么的美好
1楼 2014-06-27 15:53:42
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liushuminlsm

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
lhjun1987: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-12-15 20:13:41
我们一般上清液是不弃掉的，和消化后的细胞收集到同一管里，离心后再加入裂解液，这样体积会比较均一。
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5楼2014-07-11 11:33:28
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
youlinglyw: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-07-03 11:57:45
lhjun1987: 金币+4, ★★★很有帮助 2014-12-15 20:14:09
只有测样品的蛋白质浓度了
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2楼2014-06-29 10:37:01
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biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚：专业/专注/专心

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
youlinglyw: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-07-03 11:57:38
lhjun1987: 金币+3 2014-12-15 20:14:00
主要是要保证上样时总蛋白量一直就可以了。
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3楼2014-07-03 10:12:13
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pudding9696

无虫 (小有名气)
youlinglyw: 应助指数-1, 屏蔽内容, 违规存档, 广告 2014-07-04 15:16:05
本帖内容被屏蔽
4楼2014-07-04 14:49:15
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