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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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miclebibi

银虫 (小有名气)

[求助] pET21a的his标签表达 已有1人参与

请教大家一个问题,我用pET21a表达一个重组蛋白,表达量和活性都可以,但是不挂柱
今天看质粒图谱发现一个问题,我用的酶切位点是BamHI和SacI,这样的话在SacI后开始翻译是不是成了5个pro而不是6个his?如果用Xho位点就不会有此问题?或者在基因后添加两个碱基来移码?感谢指教!

pET21a的his标签表达
pet21a.jpg
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miclebibi

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by grase at 2014-06-13 13:37:47
这2个酶是in frame,不存在移码。看下柱子是不是出问题了。

谢谢啊,我不是很懂啊,这样的话那5个pro是怎么回事?在SacI之后不是从CGT开始翻译吗?
3楼2014-06-13 13:48:58
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grase

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【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
这2个酶是in frame,不存在移码。看下柱子是不是出问题了。
2楼2014-06-13 13:37:47
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