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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » pET21a的his标签表达
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miclebibi

银虫 (小有名气)

[求助] pET21a的his标签表达 已有1人参与

请教大家一个问题，我用pET21a表达一个重组蛋白，表达量和活性都可以，但是不挂柱
今天看质粒图谱发现一个问题，我用的酶切位点是BamHI和SacI，这样的话在SacI后开始翻译是不是成了5个pro而不是6个his？如果用Xho位点就不会有此问题？或者在基因后添加两个碱基来移码？感谢指教！

pET21a的his标签表达
pet21a.jpg
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1楼 2014-06-13 12:47:50
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grase

捐助贵宾 (职业作家)

【答案】应助回帖

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这2个酶是in frame,不存在移码。看下柱子是不是出问题了。
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2楼2014-06-13 13:37:47
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miclebibi

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by grase at 2014-06-13 13:37:47
这2个酶是in frame,不存在移码。看下柱子是不是出问题了。

谢谢啊，我不是很懂啊，这样的话那5个pro是怎么回事？在SacI之后不是从CGT开始翻译吗？
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3楼2014-06-13 13:48:58
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