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westen blot怎么转都转不上，求助
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目标蛋白分子量时14kd和25kd，bio-rad湿转，0.22um的pvdf膜，总蛋白浓度是0.2mg/mL，上样量做过10ul，20ul。湿转条件是200mA，时间分别做过1h，1.5h和2h，但是marker每次都能很好的转到膜上，但是样品用丽春红染色后发现膜上没有蛋白条带。 ps:我在考虑是不是蛋白浓度太低了，水解了？看了一些资料，资料上说一般一个泳道的上样量在30ug-100ug的蛋白量。求大家帮忙看看我这个实验！谢谢 |
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